发明名称 一种细胞荧光标记方法
摘要 本发明公开了一种细胞荧光标记方法,将点击化学与荧光量子点技术相结合,通过点击化学修饰连接剂,使用纳米量子点对细胞进行荧光标记。该方法由于使用点击化学,使量子点与生物体共价连接,快速简便,且标记产物稳定,特异性好。
申请公布号 CN103076312B 申请公布日期 2015.04.01
申请号 CN201210547974.2 申请日期 2012.12.17
申请人 深圳先进技术研究院 发明人 蔡林涛;张鹏飞;刘淑慧;高笃阳;盛宗海;胡德红;龚萍
分类号 G01N21/64(2006.01)I 主分类号 G01N21/64(2006.01)I
代理机构 深圳市科进知识产权代理事务所(普通合伙) 44316 代理人 宋鹰武
主权项 一种细胞荧光标记方法,包括以下步骤:A.使细胞与点击化学修饰连接剂结合:在含有A549肺癌细胞或RAMOS淋巴瘤细胞的DMEM培养液中,添加带有环炔基的点击化学修饰连接剂,室温反应30分钟,得到细胞‑点击化学修饰连接剂复合培养液,用pH为7.2‑7.6的缓冲液洗涤,以去除多余的点击化学修饰连接剂,并离心收集细胞,其中点击化学修饰连接剂的量为细胞摩尔量的10‑100倍;B.使用叠氮‑荧光量子点复合物对细胞进行荧光标记:将叠氮‑荧光量子点复合物加入步骤A得到的培养液中,室温孵育30分钟,得到荧光量子点标记的生物体培养液,用pH为7.2‑7.6的缓冲液洗涤,以去除多余的叠氮‑荧光量子点复合物,并离心收集荧光量子点标记的细胞,其中叠氮‑荧光量子点复合物的量为细胞摩尔量的10‑100倍,其中,所述缓冲液为PBS缓冲液或者HEPES缓冲液,所述点击化学修饰连接剂为:<img file="FDA0000593101350000011.GIF" wi="1385" he="424" />所述叠氮‑荧光量子点复合物中的量子点为粒径小于5nm的CdSe/ZnS,叠氮修饰剂为:<img file="FDA0000593101350000012.GIF" wi="589" he="684" />
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