发明名称 |
一种细胞荧光标记方法 |
摘要 |
本发明公开了一种细胞荧光标记方法,将点击化学与荧光量子点技术相结合,通过点击化学修饰连接剂,使用纳米量子点对细胞进行荧光标记。该方法由于使用点击化学,使量子点与生物体共价连接,快速简便,且标记产物稳定,特异性好。 |
申请公布号 |
CN103076312B |
申请公布日期 |
2015.04.01 |
申请号 |
CN201210547974.2 |
申请日期 |
2012.12.17 |
申请人 |
深圳先进技术研究院 |
发明人 |
蔡林涛;张鹏飞;刘淑慧;高笃阳;盛宗海;胡德红;龚萍 |
分类号 |
G01N21/64(2006.01)I |
主分类号 |
G01N21/64(2006.01)I |
代理机构 |
深圳市科进知识产权代理事务所(普通合伙) 44316 |
代理人 |
宋鹰武 |
主权项 |
一种细胞荧光标记方法,包括以下步骤:A.使细胞与点击化学修饰连接剂结合:在含有A549肺癌细胞或RAMOS淋巴瘤细胞的DMEM培养液中,添加带有环炔基的点击化学修饰连接剂,室温反应30分钟,得到细胞‑点击化学修饰连接剂复合培养液,用pH为7.2‑7.6的缓冲液洗涤,以去除多余的点击化学修饰连接剂,并离心收集细胞,其中点击化学修饰连接剂的量为细胞摩尔量的10‑100倍;B.使用叠氮‑荧光量子点复合物对细胞进行荧光标记:将叠氮‑荧光量子点复合物加入步骤A得到的培养液中,室温孵育30分钟,得到荧光量子点标记的生物体培养液,用pH为7.2‑7.6的缓冲液洗涤,以去除多余的叠氮‑荧光量子点复合物,并离心收集荧光量子点标记的细胞,其中叠氮‑荧光量子点复合物的量为细胞摩尔量的10‑100倍,其中,所述缓冲液为PBS缓冲液或者HEPES缓冲液,所述点击化学修饰连接剂为:<img file="FDA0000593101350000011.GIF" wi="1385" he="424" />所述叠氮‑荧光量子点复合物中的量子点为粒径小于5nm的CdSe/ZnS,叠氮修饰剂为:<img file="FDA0000593101350000012.GIF" wi="589" he="684" /> |
地址 |
518055 广东省深圳市南山区西丽大学城学苑大道1068号 |