一种血液和尿液中亚硝酸盐的高灵敏快速检测方法

摘要

本发明公开了一种血液、尿液中亚硝酸盐的快速检测方法。利用亚硝酸盐与Griess试剂发生重氮化偶合反应，形成偶氮化合物，用非离子表面活性剂包括脂肪醇聚氧乙烯醚AEO系列进行浊点萃取，具有操作条件温和、浊点温度低、分相时间短、萃取效率高等特点。体系中亚硝酸盐检测限可达0.005µg/mL。该发明具有简单、快速、灵敏度高、可现场检测等特点。

主权项

一种血液和尿液中亚硝酸盐快速检测方法，包括以下步骤：（1）制备亚硝酸盐标准色阶溶液：取浓度为5.0µg/mL 的NO₂^‑ 标准溶液0.005、0.01、0.05、0.10、0.30、0.70、1.0mL于刻度离心管中，用蒸馏水稀释至5mL，加入GriessA试剂250µL，混合均匀；1min后加入GriessB试剂250µL，混合均匀，加入非离子表面活性剂0.1mL，降浊点和相分离促进剂氯化钠或硫酸铵0.1～0.5g或有机醇0.05～0.2mL，涡旋混合1min，离心5～15min分相，溶液上层表面活性剂相出现由浅至深的红色环色阶；（2）检测尿液中的亚硝酸盐：取10mL尿液，硫酸锌0.4～1.0g，加入活性炭0.5～1.0g，混合均匀，离心脱色，滤纸过滤除去活性炭；取5mL脱色后的尿液，加入GriessA试剂250µL，混合均匀；1min后加入GriessB试剂250µL，混合均匀，放置5min后，加入非离子表面活性剂0.1mL，降浊点和相分离促进剂氯化钠或硫酸铵0.1～0.5g或有机醇0.05～0.2mL，涡旋混合1min，离心5～15min分相，将溶液上层表面活性剂相的颜色与步骤（1）标准色阶比较，判断其含量；（3）检测血液中的亚硝酸盐：取5 mL新鲜血液，放入离心机中离心，取上清液，加入0.1mol/L氢氧化钠溶液0.2mL和硫酸锌0.2g,混合均匀，加入乙腈1mL，离心分离，取上清液2mL于10mL离心管中用蒸馏水定容至5mL,加入GriessA试剂250µL，混合均匀；1min后加入GriessB试剂250µL，混合均匀，放置5min, 加入非离子表面活性剂0.2mL，降浊点和相分离促进剂氯化钠或硫酸铵0.1～0.5g或有机醇0.05～0.2mL，涡旋混合1min，离心5～15min分相，将溶液上层表面活性剂相的颜色与步骤（1）标准色阶比较，判断其含量。