一种从蔓荆子中提取总黄酮的方法

摘要

本发明公开了一种从蔓荆子中提取总黄酮的方法，将蔓荆子粉碎成粗粉，用80％乙醇提取，合并提取液，减压浓缩得浸膏I；将浸膏I分散于水中，超声溶解后加冷水稀释，将溶液过孔吸附树脂柱(AB-8)上样，再用pH＝7的80％乙醇洗脱至流出液无黄酮，减压浓缩得浸膏II；将浸膏II分散于水中，超声溶解，将配好的此溶液经大孔吸附树脂柱(AB-8)上样，再用PH＝7的80％乙醇洗脱，至流出液无黄酮，减压浓缩得浸膏III；将浸膏III搅拌均匀，减压真空干燥，碾磨成粉末，得到蔓荆子总黄酮；该方法从蔓荆子中提取的总黄酮为棕褐色粉末，且具有靶向抑制肿瘤干细胞特性作用具有较强的推广与应用价值。

主权项

一种从蔓荆子中提取总黄酮的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：步骤一，将蔓荆子粉碎成粗粉，60℃于干燥箱干燥1h，用80％乙醇提取，75℃回流提取3h/次，合并提取液，减压浓缩，得浸膏I；步骤二，将浸膏I分散于水中，超声溶解后加冷水稀释，浓度为3mg/ml，pH＝3，将溶液过孔吸附树脂柱AB‑8上样，流速2ml/min，至流出液在GF254硅胶板上点样，紫外灯254nm下无斑点，再用pH＝7的80％乙醇洗脱至流出液无黄酮，流分合并，减压浓缩，得浸膏II；步骤三，将浸膏II分散于水中，超声溶解，浓度为3mg/ml，pH＝3，再次将配好的此溶液经大孔吸附树脂柱AB‑8上样，流速2ml/min，至流出液在GF254硅胶板上点样，紫外灯254nm下无斑点，再用PH＝7的80％乙醇洗脱，至流出液无黄酮，合并流分，减压浓缩，得浸膏III；步骤四，将浸膏III搅拌均匀，减压真空干燥，碾磨成粉末，得到蔓荆子总黄酮；在步骤一中，用80％乙醇提取时，用量为1∶5kg/L；该方法从蔓荆子中提取的总黄酮为棕褐色粉末；鉴别总黄酮的方法为：取总黄酮5mg，用甲醇2ml溶解，滤过所得滤液作为供试品溶液；取紫花牡荆素对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一用1％氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以环己烷‑乙酸乙酯‑甲醇酯‑甲醇3∶2∶0.2为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％三氯化铝乙醇溶液；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；总黄酮含量的检测方法为：称取15.0mg芦丁对照品，用甲醇配制成100ml，分别取0.2、0.4、0.8、1.0、1.2ml稀释至10ml，即成浓度分别为3.00、6.00、12.00、15.00、18.00ug/ml的溶液；用紫外分光光度计在258nm处测定吸光度；以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制芦丁标准曲线；取提取物11.0mg，用无水甲醇配制成50ml，取1.0ml，稀释至10ml，用紫外分光光度计在258nm处测定吸光度，从标准曲线上读出供试品中芦丁的量，计算即得；该方法从蔓荆子中提取的总黄酮具有靶向抑制肿瘤干细胞特性作用。