一种应用大肠杆菌高效合成聚3-羟基丙酸的方法

摘要

本发明公开了一种应用大肠杆菌高效合成聚3-羟基丙酸的方法，包括(1)将工程大肠杆菌按1∶100的比例接种到含有20g/L甘油的M9液体培养基，加入诱导剂IPTG；(2)在摇瓶中添加IPTG；(3)用氯仿萃取细胞中的聚3-羟基丙酸，在氯仿溶液中加入10倍体积的冰乙醇沉淀聚3-羟基丙酸，沉淀用乙醇清洗后干燥称重。通过本发明制得的聚3-羟基丙酸具有成本低、操作简单、条件温和、绿色环保等优点；其合成工艺简单，成本低廉，具有广阔的应用前景。

主权项

一种应用大肠杆菌高效合成聚3‑羟基丙酸的方法，包括下述步骤：(1)将工程大肠杆菌按1∶100的比例接种到含有20g/L甘油的M9液体培养基，并置于250ml摇瓶中，氨苄青霉素的浓度为50μg·mL‑1，37℃，225rpm条件下振荡培养，当OD_600nm为0.6时，在菌液中加入诱导剂IPTG至终浓度0.2mmol·L‑1；(2)然后每隔12h，在摇瓶中添加IPTG(0.2mM)、biot in(40mgL^‑1)和NaHCO₃(20mM)，诱导后60h终止发酵；(3)离心收集菌体，用去离子水洗涤两次，真空干燥，用氯仿萃取；在氯仿溶液中加入10倍体积的冰乙醇沉淀聚3‑羟基丙酸，得到的沉淀用乙醇清洗后干燥，即得聚3‑羟基丙酸。