甲型H1N1猪流感病毒实时荧光RT-PCR检测试剂盒及其应用

摘要

本发明公开了一种甲型H1N1猪流感病毒荧光定量RT-PCR检测试剂盒及其应用。本发明通过序列多重比对，针对甲型H1N1(2009)猪流感病毒、欧亚类禽型H1N1猪流感病毒、经典型H1N1猪流感病毒及人源H1N1猪流感病毒的保守基因片段，设计出特异性强的检测甲型H1N1猪流感病毒的引物和探针，用于实时荧光RT-PCR检测。实验结果表明使用本发明所提供的特异性PCR引物对及TaqMan荧光探针用于检测甲型H1N1猪流感病毒特异性高，灵敏度可达2.6×10^-5ng/反应，不仅可以对待测猪群的的鼻腔拭子、肺脏，气管等组织样品进行检测，还可检测鸡胚尿囊液，操作简单、容易推广，便于基层操作和应用，可成为甲型H1N1猪流感病毒疫病诊断和流行病学调查的有用检测工具。

主权项

一种甲型H1N1猪流感病毒荧光定量RT‑PCR检测试剂盒，其特征在于包括一对特异性引物和荧光探针，所述特异性引物由上游引物和下游引物组成，所述特异性引物和荧光探针的序列如下所示：上游引物：5’‑AAATCTAGTGGTACCGAGATATGCA‑3’；下游引物：5’‑GGGAGGCTGGTGTTTATAGCAC‑3’；特异性探针：5’‑F‑CAATGGAAAGAAATGCTGG‑Q‑3’，其中F为荧光报告基团，Q为荧光淬灭基团。