一种分析土壤原位腐殖质电子转移能力的方法

摘要

一种分析土壤原位腐殖质电子转移能力的方法，除铁后的土壤加入NaHCO₃缓冲溶液形成土壤悬浮液，采用希瓦氏菌微生物对土壤悬浮液进行接种，加入乳酸钠与无机盐溶液分别作为微生物的碳源与无机营养源，通入氮气保持厌氧状态，密封后置于室温下振荡进行培养；在厌氧条件下采用氮川三乙酸根合铁来分别氧化土壤悬浮液中总腐殖质和水溶性腐殖质，通过分析生成Fe²⁺的浓度分别测定土壤悬浮液中总腐殖质和水溶性腐殖质的微生物还原量；根据二者的差异来计算土壤原位腐殖质电子转移能力。本发明提供的分析土壤原位腐殖质电子转移能力的方法不仅可以真实表征土壤原位腐殖质的电子转移能力，误差小，而且成本较低，容易操作，可批量式进行，效率高。

主权项

一种分析土壤原位腐殖质电子转移能力的方法，包括如下步骤：1)土壤鲜样中加入连二亚硫酸钠‑柠檬酸钠‑重碳酸钠溶剂以提取土壤本底铁，混合均匀后静置，离心去除提取液；2)在离心后的固体样品加入NaHCO₃缓冲溶液，使之形成土壤悬浮液；3)采用富集培养后的异化铁还原菌微生物对土壤悬浮液进行接种，并加入乳酸钠试剂作为微生物的碳源，加入无机盐作为微生物的无机营养液；4)通入氮气以保持厌氧状态，密封置于振荡培养箱中，室温下振荡培养；5)取步骤4培养后的土壤悬浮液加入氮川三乙酸根合铁溶液，通入氮气以保持厌氧状态，密封置于振荡培养箱中，室温下振荡反应；取反应后的土壤悬浮液过纤维素滤膜后，加入邻菲罗啉溶液，采用紫外‑可见分光光度计测定波长510nm处的吸光度值，并基于标准曲线将吸光度值换算成Fe²⁺浓度A；6)取步骤4培养后的土壤悬浮液过纤维素滤膜后加入氮川三乙酸根合铁溶液，通入氮气以保持厌氧状态，密封于室温下静置反应；取反应后的溶液加入邻菲罗啉溶液，采用紫外‑可见分光光度计测定波长510nm处的吸光度值，并基于标准曲线将吸光度值换算成Fe²⁺浓度B；7)基于以下公式计算出单位质量土壤所转移的电子数量，并将其作为土壤原位腐殖质电子转移能力ESC_SH：ESC_SH(e^‑/g土壤)＝[(A‑B)×25/1000]/[5×(5/120)×(5/10)]式中：A是步骤5测得的吸光度值换算成的Fe(II)浓度，单位是mmol/L；B是步骤6测得的吸光度值换算成的Fe(II)浓度，单位是mmol/L。