利用美丽鸡血藤非胚性细胞悬浮培养生产牛大力多糖的方法

摘要

本发明公开了一种利用美丽鸡血藤非胚性单细胞悬浮培养生产牛大力多糖的方法，含以下步骤：取美丽鸡血藤外植体，在愈伤诱导培养基上进行培养，获得非胚性愈伤组织；将非胚性愈伤组织在愈伤增殖培养基上进行增殖培养，获得生长迅速疏松的细胞团；将细胞团接种至细胞悬浮启动培养基中培养，获得液体培养的单细胞悬浮系；将单细胞悬浮系离心沉淀后，取沉淀接种至液体增殖培养基中，获得悬浮细胞；将悬浮细胞，水提取后，在提取液中加水无水乙醇至溶液中乙醇的体积百分含量为60～75%，取上清液，旋蒸后，获得牛大力粗多糖。该方法具有生产周期短、不占用耕地、产量稳定、有效成分含量高、不破坏自然资源的特点，具有极大的开发利用价值。

主权项

一种利用美丽鸡血藤非胚性细胞悬浮培养生产牛大力多糖的方法，其特征是含以下步骤：（1）取美丽鸡血藤外植体，在愈伤诱导培养基上进行培养，获得非胚性愈伤组织；（2）将步骤（1）中获得的非胚性愈伤组织在愈伤增殖培养基上进行增殖培养，获得生长迅速疏松的细胞团；（3）将步骤（2）获得的细胞团接种至细胞悬浮启动培养基中培养，获得液体培养的具有轴性分裂特征的非胚性悬浮细胞系；（4）将步骤（3）获得的非胚性悬浮细胞系离心沉淀后，取沉淀接种至液体增殖培养基中，获得生长周期稳定、生长迅速的悬浮细胞，该悬浮细胞为适合于提取牛大力多糖的非胚性悬浮细胞系；（5）取步骤（4）获得的悬浮细胞，水提取1~3次，合并提取液，在提取液中加入无水乙醇至溶液中乙醇的体积百分含量为60~75%，取上清液，旋蒸后，获得牛大力粗多糖。