一种液固双相发酵生产绿色木霉的方法

摘要

本发明公开了一种液固双相发酵生产绿色木霉的方法。本发明提供的培养绿色木霉的方法，包括如下步骤：(1)将绿色木霉进行液体发酵，得到液体发酵产物；(2)将液体发酵产物进行固体发酵。本发明提供的绿色木霉的培养方法，生产工艺经济实用、生产效率高、投资少、占地小、生产可以实现规模化且无三废问题，适于大量推广应用，将产生巨大的经济效益。

主权项

一种培养绿色木霉的方法，包括如下步骤：(1)将绿色木霉进行液体发酵，得到液体发酵产物；(2)将液体发酵产物进行以膨胀蛭石为载体的固体发酵；所述液体发酵的条件为：27‑29℃，通入空气且通气量为9‑11L/min，0.02‑0.04Mpa；所述液体发酵的时间为65小时‑72小时；所述液体发酵是在液体发酵培养基中进行的；所述液体发酵培养基的制备方法如下：取蔗糖9‑11g、玉米粉9‑13g、NH₄NO₃1.8‑2.2g、大豆粕4‑5.5g、MgSO₄·7H₂O 0.8‑1.2g和KH₂PO₄2‑4g，溶于水并用水定容至1000mL；所述固体发酵依次包括a阶段、b阶段和c阶段：a阶段：在温度为23‑25℃、湿度为93‑97％的条件下培养，培养时间为2‑3天；b阶段：在温度为27‑29℃、湿度为78‑82％的条件下培养，培养时间为3天；c阶段：在温度为25‑27℃、湿度为38‑42％的条件下培养，培养时间为1天；所述固体发酵是在以膨胀蛭石为载体的固体发酵培养基中进行的；所述固体发酵培养基的制备方法如下：将300‑400质量份膨胀蛭石、50‑70质量份玉米粉、10‑20质量份麸皮、0.8‑1.2质量份KH₂PO₄、0.4‑0.6质量份MgSO₄和150‑250份水混合均匀；所述步骤(1)中，将4‑6体积份所述绿色木霉的种子液接种至94‑96体积份所述液体发酵培养基，即为所述液体发酵的初始时刻；所述种子液的菌浓度为6.2‑8.5×10⁸CFU/mL；所述步骤(2)中，将18‑22体积份所述步骤(1)得到的液体发酵产物接种至78‑82体积份所述固体发酵培养基，即为所述固体发酵的初始时刻；所述绿色木霉为绿色木霉(Trichoderma viride)H06 CGMCC No.6229。