发明名称 |
糜蛋白酶原的仿生亲和材料的制备及糜蛋白酶纯化方法 |
摘要 |
本发明涉及一种糜蛋白酶原仿生亲和材料的制备及糜蛋白酶纯化方法,包括下列步骤:(1)基础层析介质与三氯三氮嗪反应活化后,分别与L-缬氨酸以及对氨基苯磺酸反应,合成仿生亲和分离材料;(2)用制备的仿生亲和分离材料纯化糜蛋白酶原,将含有糜蛋白酶原的样品流过该亲和层析柱,糜蛋白酶原吸附在亲和层析柱上,冲洗亲和层析柱,不吸附在亲和层析柱上的杂蛋白被除去,然后变换缓冲液条件,将结合的糜蛋白酶原洗脱下来。(3)用胰蛋白酶进行糜蛋白酶原的激活。本发明能够高效率、低成本的大规模生产高酶活的糜蛋白酶。 |
申请公布号 |
CN104419695A |
申请公布日期 |
2015.03.18 |
申请号 |
CN201310369661.7 |
申请日期 |
2013.08.22 |
申请人 |
上海亨臻实业有限公司 |
发明人 |
李荣秀;马贵军;翟东改;阳成成 |
分类号 |
C12N9/76(2006.01)I |
主分类号 |
C12N9/76(2006.01)I |
代理机构 |
上海一平知识产权代理有限公司 31266 |
代理人 |
崔佳佳;马莉华 |
主权项 |
一种糜蛋白酶原仿生亲和材料的制备及糜蛋白酶纯化方法,其特征在于,包括下列步骤: (1)仿生亲和分离材料结构是在基础层析介质上通过三氮嗪骨架作为间臂固定L‑缬氨酸及对氨基苯磺酸; (2)用制备的仿生亲和分离材料纯化胰脏提取液上清; (3)用胰蛋白酶进行糜蛋白酶原的激活,得到糜蛋白酶。 |
地址 |
200131 上海市浦东新区自由贸易试验区富特东一路458号5层518室 |