肺炎支原体P1-RFLP分型检测引物及方法

摘要

一种肺炎支原体P1-RFLP基因分型检测引物及方法，根据已知的Mp两个国际标准株P1基因的RepMP4和RepMP2/3序列，分析其中的HaeIII酶切位点所在区域，在序列中间部位包含酶切位点区域设计相邻的内套引物分别向两端进行特异性扩增，然后分别将这些内套扩增产物混合后用HaeIII内切酶进行酶切，根据酶切产物图谱的不同来判断不同的型别，解决了目前肺炎支原体P1-RFLP基因分型扩增片段较长，不易被扩增，费时、费力且不能在临床上大规模检测的问题。

主权项

一种肺炎支原体感染标本新的P1‑RFLP检测分型引物，分析两个已知的Mp标准株M129和FHP1基因RepMP4和RepMP4序列，在序列的中间部位包含HaeIII酶切位点区域设计8条内套引物，其特征在于RepMP4序列的4条内套引物为上游引物ADH1in：ATTCTCATCCTCACCGCCA，下游引物ADH1M：CCTTGGGATCCAAGTGATCA以及上游引物ADH2M：TGATCACTTGGATCCCAAGG，下游引物ADH2in：CTGCTAACAATTCCGGATTGAG；RepMP2/3序列的4条内套引物为上游引物ADH3in:TTGCTGCTAACGAGTACGAG，下游引物ADH3M:CAAATCCCACACACTCTCCA以及下游引物ADH4in：TGACTGATACCTGTGCGG，上游引物ADH4M：TGGAGAGTGTGTGGGATTTG，所述的标本为提取患者体液的DNA，所述的体液为患者的痰、鼻咽拭子、肺泡灌洗液、胸腔积液、脑脊液、关节液或血液。