结核感染T细胞免疫的四聚体检测方法

摘要

本发明公开一种结核感染T细胞免疫的四聚体检测方法，从全血样本中分离出外周血单个核细胞，将其与结核杆菌特异性抗原一起孵育，当外周血中存在针对结核杆菌的效应T淋巴细胞时，结核杆菌特异性抗原中的TCR与MHC-多肽复合物结合，借助生物素-链霉亲和素系统，将MHC-多肽复合物形成四聚体分子，单个MHC-多肽四聚体分子与T细胞表面的多个TCR结合，以提高了MHC-多肽复合物与TCR的亲和力和稳定性；再加入生物素标记的检测抗体标记有PE荧光染料；最后通过流式细胞仪对特异T细胞进行计数以对结核病进行辅助诊断，本发明检测灵敏度和准确性和产品特异性高、应用方便简单，安全可靠。

主权项

一种结核感染T细胞免疫的四聚体检测方法，其特征在于：从全血样本中分离出外周血单个核细胞，即PBMCs，将其与结核杆菌特异性抗原一起孵育，当外周血中存在针对结核杆菌的效应T淋巴细胞时，结核杆菌特异性抗原中的TCR与MHC‑多肽复合物结合，借助生物素‑链霉亲和素系统，将MHC‑多肽复合物形成四聚体分子，单个MHC‑多肽四聚体分子与T细胞表面的多个TCR结合，以提高了MHC‑多肽复合物与TCR的亲和力和稳定性；再加入生物素标记的检测抗体标记有PE荧光染料；最后通过流式细胞仪对特异T细胞进行计数以对结核病进行辅助诊断。