发明名称 |
一种在贝类幼虫中定量检测甲状腺激素的方法 |
摘要 |
本发明涉及生物学领域,具体说是一种简单快速准确的测定贝类中的甲状腺激素含量的方法。该方法包括如下步骤:将幼虫样品用研磨成粉末状;低温干燥,分成AB两部分,将A部分样品准确称量干重后,加入NaOH溶液,浸润1h以上,提取甲状腺激素,离心上清用于定量检测甲状腺激素的含量;将B部分样品准确称量干重后加入细胞裂解液和PMSF室温放置1h以上,裂解细胞释放蛋白;用于检测样品中总蛋白含量;将数据整合,计算出幼虫中每克蛋白含甲状腺激素x克,即x g/g protein。本发明提供的方法能简单,快速,准确的测定出贝类中的甲状腺激素含量。预处理步骤简单,无毒操作。适用于两种甲状腺激素的定量检测。 |
申请公布号 |
CN103529226B |
申请公布日期 |
2015.03.18 |
申请号 |
CN201210545897.7 |
申请日期 |
2012.12.14 |
申请人 |
中国科学院海洋研究所 |
发明人 |
黄雯;阙华勇;许飞;李莉;张国范 |
分类号 |
G01N33/78(2006.01)I;G01N30/02(2006.01)I |
主分类号 |
G01N33/78(2006.01)I |
代理机构 |
沈阳科苑专利商标代理有限公司 21002 |
代理人 |
李颖 |
主权项 |
一种在贝类幼虫中定量检测甲状腺激素的方法,其特征在于:该方法包括如下步骤:1)将幼虫样品用液氮研磨法研磨成粉末状;2)研磨后进行低温干燥,分成AB两部分分别用于以下步骤;3)将A部分样品准确称量干重后,按固定比例加入0.01mol/L NaOH溶液,2‑8℃下充分浸润1h以上提取甲状腺激素;4)8000‑12000rpm离心5‑10min,取上清;5)取步骤4)中的上清,用于定量检测甲状腺激素的含量;即总甲状腺素T4和总3,5,3′‑三碘甲腺原氨酸T3;6)将B部分样品准确称量干重后加入细胞裂解液和PMSF室温放置1h以上,裂解细胞释放蛋白;7)将步骤6)中裂解细胞释放蛋白用于检测样品中总蛋白含量;8)将数据整合,计算出幼虫中每克蛋白含甲状腺激素x克,即xg/gprotein。 |
地址 |
266071 山东省青岛市南海路7号 |