一种从双孢蘑菇中分离双孢蘑菇多糖的方法及其测定方法

摘要

一种从双孢蘑菇中分离双孢蘑菇多糖的方法，将双孢蘑菇真空冷冻干燥24h；热水浸提粗多糖：加入蒸馏水，大火煮沸，文火维持，离心取上清液，沉淀放回加热设备中加水继续加热致沸腾，文火维持，再离心取上清液；重复三次，将获得的上清液用蒸馏水定容备用；双水相萃取操作：精确称取聚乙二醇(PEG)60002.66g，硫酸铵4.28g，加入到50mL离心管中，加入样品稀释液20mL混匀；同时称取PEG6000 2.66g，硫酸铵4.28g，加入到50mL离心管中，加入蒸馏水20mL混匀，得到的双孢蘑菇多糖被分配在PEG相中。利用双水相体系萃取双孢蘑菇多糖最大收率为80.1％，得率可以达到17.45mg/g。

主权项

一种从双孢蘑菇中分离双孢蘑菇多糖的方法，其特征在于：使用材料：鲜双孢蘑菇；使用试剂：苯酚、浓硫酸、葡萄糖、硫酸铵(NH₄)₂SO₄、聚乙二醇(PEG)6000、蒸馏水；使用仪器设备：10mL离心管、50mL离心管、真空冷冻干燥器、离心机；分离方法及步骤(1)材料预处理：将新鲜的双孢蘑菇真空冷冻干燥24h；(2)热水浸提粗多糖：将干燥后的双孢菇粉碎后称取两克，置于不锈钢或玻璃容设备中，加入200mL蒸馏水，大火煮沸，文火维持1小时，离心取上清液，沉淀放回加热设备中加水100mL继续加热致沸腾，文火维持30min，再离心取上清液；重复三次，将获得的上清液装入1000mL容量瓶中用蒸馏水定容至1000mL备用；(3)双水相萃取操作：精确称取聚乙二醇(PEG)6000 2.66g，硫酸铵4.28g，加入到50mL离心管中，加入样品稀释液20mL混匀；同时称取PEG6000 2.66g，硫酸铵4.28g，加入到50mL离心管中，加入蒸馏水20mL混匀，作为对照，在离心机中以3000r/min离心5min，读取样品管上下相体积，上相体积为9.5mL，下相体积为14.5mL；得到的双孢蘑菇多糖大部分被分配在PEG相(上相)中。