主权项 |
一种狐尾兰芽尖组织培养快速繁殖方法, 其特征在于该方法包括以下步骤:1)外植体的消毒:选取2‑3厘米长的幼嫩花芽,用自来水冲洗干净,并置于超净工作台上用75%的酒精浸泡15~45秒,再用0.1% HgCl2溶液灭菌8~10分钟,无菌水冲洗5~8次后,用无菌滤纸吸干残余水分,切取0.3‑0.5厘米长的芽尖接种在诱导培养基上;2)丛生芽的诱导:采用诱导培养基培养30~60天,芽点变绿增大,成球状茎;培养过程中,光照强度1500~2000lx,光照12小时/天,温度25~28℃;3)丛生芽的增殖:利用芽尖培养得到的芽点,转移到丛生芽增殖培养基,培养90~120天,增殖倍数在4.5~7.5,获得大量的丛生芽;培养条件为:光照强度1500~2000lx,光照12小时/天,温度25~28℃;4)继代培养:采用继代培养基进行继代培养,每90~120天继代增殖1次,并将继代次数控制在15次内;培养条件为:光照强度1500~2000lx,光照12小时/天,温度25~28℃;5)生根培养:当继代苗达到合适数量后,采用生根培养基进行生根培养,60~90天,得到生根苗;培养条件为:光照强度1500~2000lx,光照12小时/天,温度25~28℃;6)试管苗移栽:选择每年3~5月份为出瓶移栽的季节,或者提供类似3~5月份自然条件的生长环境进行出瓶移栽;移栽前,试管苗放置于具自然光散射的温室中炼苗20~30天,然后从试管中取出小苗,清洗根部的培养基,并放于高锰酸钾溶液中浸泡3~5分钟,取出后用水苔种植于口径的4.8cm塑料杯盆中;温室须保持通风,湿度在70~80%,温度保持在15℃以上至室温范围内,高于30℃必须用风机、水帘降温。 |