一种粘虫幼虫围食膜的制样方法

摘要

本发明涉及一种粘虫幼虫围食膜的制样方法，其特征在于包括如下步骤：(1)将粘虫幼虫置于盛有石腊的培养皿中，用昆虫针分别从头部和腹部末端固定粘虫幼虫虫体，使其腹面朝上；(2)沿粘虫幼虫的腹中线剖开，取出围食膜，清洗除去围食膜中的内容物；(3)将围食膜置于木制圆片表面，用针尖沿围食膜外周将围食膜固定在木制圆片上；(4)将固定好的围食膜样品放入盛有戊二醛固定液的青霉素小瓶中浸泡；取出后经冲洗、脱水、置换、干燥后，在真空喷镀仪内喷镀金属膜，即获粘虫幼虫围食膜样品，本发明能较好地解决制作昆虫围食膜电镜样品时难以获得围食膜舒展观察面而严重影响观察效果的问题，可获得高质量的粘虫幼虫围食膜样品，具有方法简单、经济实用的特点。

主权项

一种粘虫幼虫围食膜的制样方法，其特征在于包括如下步骤：(1)、将粘虫幼虫置于盛有石腊的培养皿中，用3号昆虫针分别从头部和腹部末端固定粘虫幼虫虫体，使其腹面朝上；(2)、用医用刀沿粘虫幼虫的腹中线剖开，取出围食膜置于清水中，清洗除去围食膜中的内容物；(3)、将清洗后的围食膜置于木制圆片表面，截取0号昆虫针的针尖部分，用针尖沿围食膜外周将围食膜固定在木制圆片上；(4)、将固定好的围食膜样品放入盛有戊二醛固定液的青霉素小瓶中浸泡12－16小时；取出后用磷酸缓冲液冲洗3次，每次10分钟；然后用30％、50％、75％、80％、90％、95％丙酮脱水各一次，每次10分钟；100％的酒精脱水2次，每次20分钟；乙酸异戊酯置换两次，每次20分钟；CO₂临界点干燥后轻轻拨掉针尖，在真空喷镀仪内喷镀10‑20nm的金属膜，即获粘虫幼虫围食膜样品，将围食膜样品置于电子显微镜下观察围食膜表面形态结构并照相。