分离组蛋白H4-K16乙酰化标记多肽的分子印迹微球

摘要

一种分离组蛋白H4-K16乙酰化标记多肽的分子印迹微球的制备方法，包括如下步骤：首先在硅胶表面接枝双官能团戊二醛，然后在硅胶表面键合印迹分子，最后合成分子印迹聚合物微球。本发明的优点是：该分子印迹聚合物微球对于含有乙酰化K16的组蛋白H4水解后的标记肽段GGAKacR具有很好的识别能力及选择性，可以用于组蛋白H4水解样品中含有乙酰化K16的标记肽段的选择性富集及测定；同时由于印迹位点在材料表面，该分子印迹聚合物微球也能够对于C端具有GGAKacR序列的长链肽段进行选择性提取，在加标组蛋白水解样品的提取实验中，这种分子印迹微球对于肽段的回收率达到80％以上，可以在组蛋白H4-K16乙酰化的测定中发挥作用。

主权项

一种分离组蛋白H4‑K16乙酰化标记多肽的分子印迹微球，其特征在于：是以三氟代甲基丙烯酸为单体、N’N‑乙烯基双丙烯酰胺为交联剂的交联高分子聚合物，粒径为20微米，聚合物表面带有识别GGAKacR以及C端含有GGAKacR肽段的长链多肽的结合位点；微球材料对于GGAKacR有很好的选择性，作为吸附材料，分子印迹聚合物微球在磷酸盐缓冲液中对于GGAKacR的吸附容量为50μmol·g^‑1左右；微球材料对于印迹分子的印迹因子≥2.5，印迹因子由IF＝Q_MIP/Q_NIP计算，其中Q_MIP是分子印迹聚合物对于印迹分子的吸附容量(μmol·g^‑1)，Q_NIP为非印迹聚合物对于印迹分子的吸附容量(μmol·g^‑1)；以分子印迹聚合物微球作为色谱固定相，以磷酸盐缓冲液(20mM，pH＝7.0)为流动相，印迹分子GGAKacR的保留因子为5.9，由液相色谱法测定的分子印迹材料的选择性因子α≥1.7，选择性因子由α＝k_I/k_X计算,其中，k_I为印迹分子的保留因子，k_X为其类似物的保留因子。