仔猪乳糖消化性状的LCT基因多态性检测方法及其应用

摘要

仔猪乳糖消化性状的LCT基因多态性检测方法，主要步骤包括：从猪耳中提取组织DNA、设计引物、获得LCT基因5'UTR区序列，进行PCR产物克隆测序；PCR-SSCP和PCR产物直接测序进行多态性检测；多态性与仔猪乳糖不耐受性腹泻性状的相关分析。这些结果证实了LCT基因5'UTR多态性与仔猪乳糖不耐受性腹泻之间有显著相关。本发明还公开了用于扩增LCT基因5'UTR多态性的2对引物序列，以及该基因片段的3个碱基突变位点，以及该多态性在仔猪乳糖不耐受性腹泻性状上的检测、评价和应用。本发明为猪标记辅助选择和猪育种提供了一种新的分子标记。

主权项

一种用于鉴定仔猪LCT基因5'UTR多态性的方法，其特征在于，野猪和地方猪中，利用引物SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:5进行仔猪LCT基因增强子区PCR扩增，获得增强子‑797bp位点基因型，利用引物SEQ ID NO:6和SEQ ID NO:7进行仔猪LCT基因5'UTR启动子区PCR扩增，获得启动子‑308bp和‑301bp位点基因型；当仔猪LCT基因5'UTR增强子‑797bp位点为GG基因型，或启动子‑308bp和‑301bp位点为GAGA基因型，或增强子‑797bp位点、启动子‑308bp位点和启动子‑301bp位点组成的单倍型为GGA时，均与仔猪乳糖不耐受性腹泻呈显著相关；当仔猪LCT基因5'UTR增强子‑797bp、启动子‑308bp和‑301bp为其他基因型或单倍型时，均与仔猪乳糖不耐受性腹泻不显著相关。