发明名称 一种猪链球菌2型的SS2-LAMP检测试剂盒及应用
摘要 本发明公开了一种猪链球菌2型的SS2-LAMP检测试剂盒及应用,该试剂盒由猪链球菌前处理液和LAMP反应试剂组成,包括SEQIDNO.1、SEQIDNO.2、SEQIDNO.3、SEQIDNO.3、SEQIDNO.4、SEQIDNO.5、SEQIDNO.6;还包括以下组分:(1)前处理液;(2)LAMP反应液;(3)聚合酶;(4)显色液;(5)阳性对照样品为基因组,阴性对照为无菌去离子水。能快速检测食品中或者动物污染或携带的猪链球菌2型。提高了检测的灵敏度并减少了检测时间,在检测靶点的选择上进行了创新,极大提高检测的准确性。方法简单易行,节省时间,降低成本。检测过程不需要PCR仪和检测的设备,反应时间短,灵敏度高,能检测到fg级别的核酸,适合快速检测医疗卫生、动物疫病或食品安全领域中的猪链球菌2型。
申请公布号 CN104404132A 申请公布日期 2015.03.11
申请号 CN201410543156.4 申请日期 2014.10.14
申请人 华中农业大学 发明人 李锦铨;周洋;王小红;陈福生;邓柳燕
分类号 C12Q1/68(2006.01)I;C12Q1/14(2006.01)I;C12R1/46(2006.01)N 主分类号 C12Q1/68(2006.01)I
代理机构 武汉宇晨专利事务所 42001 代理人 王敏锋
主权项 一种猪链球菌2型的LAMP检测试剂盒,该试剂盒由猪链球菌前处理液和LAMP反应试剂组成,其特征在于:包括引物组SS21‑FIP的核酸序列SEQ ID NO.1所示、SS21‑BIP引物的核酸序列SEQ ID NO. 2所示、SS21‑F3引物的核酸序列SEQ ID NO. 3所示、SS21‑B3引物的核酸序列SEQ ID NO. 3所示、SS21‑F3引物的核酸序列SEQ ID NO. 4所示、SS21‑LF引物的核酸序列SEQ ID NO. 5所示、SS21‑LB引物的核酸序列SEQ ID NO. 6所示;   所述的试剂盒还包括以下组分:(1)前处理液:20 mM Tris‑HCl;(2) LAMP反应液:20 mM Tris‑HCl、10mM (NH4)<sub>2</sub>SO4、10mM KCl、2mM MgSO4、10μM dNTPs、20μmol/L SS21‑FIP、20μmol/L SS21‑BIP、10μmol/L SS21‑F3、10μmol/L SS21‑B3、10μmol/L SS21‑LF and 10μmol/L SS21‑LB;(3) 聚合酶:3个酶活单位的Bst DNA聚合酶;(4) 显色液:含有10%体积比SYBR Green I 的荧光染料;(5) 阳性对照样品为猪链球菌2型的基因组,阴性对照为无菌去离子水。
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