一株高产雄甾-4-烯-3,17-二酮的植物甾醇转化菌株的选育

摘要

一株高产雄甾-4-烯-3,17-二酮的植物甾醇转化菌株的选育，属于生物工程中发酵技术领域。本发明以实验室保藏的一株能有效转化植物甾醇为AD和ADD的菌株解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloiquefaciens)ST 06为出发菌株；经常压室温等离子体(ARTP)诱变后，经过一系列的初筛和复筛，从500株变异菌株中筛选得到一株高产雄甾-4-烯-3,17-二酮AD的菌株ST12-96，对其进行发酵优化显示在温度30℃、pH 7.0、160rpm的条件下培养48h达到对数生长期，将对数生长期的菌体以10％(V/V)的接种量接入发酵培养基，在30℃、pH 7.0、160rpm的条件下培养7d，对发酵产物进行定量检测，植物甾醇转化为AD的转化率达到了75.95％，产物AD含量达到8.41g/L，AD占到AD与ADD总和的95.02％。本发明首次将解淀粉芽孢杆菌用于AD的生物合成。

主权项

采用常压室温等离子体(ARTP)诱变技术，得到一株高产雄甾‑4‑烯‑3,17‑二酮AD的植物甾醇转化菌株，其分类命名为解淀粉芽孢杆菌ST 12‑96，该菌株相较于出发菌株解淀粉芽孢杆菌ST 06，在底物投加量为15g/L情况下，发酵7d后，AD的产量从2.84g/L提高到了8.41g/L，AD在AD与ADD的产物混合物中的比例由2.5:1提高到了18:1。