一种纳米钻石靶向药物的制备方法和应用

摘要

本发明提供了一种转铁蛋白修饰的纳米钻石靶向药物的制备方法和应用。将转铁蛋白Tf溶于PBS缓冲溶液中，再加入DOX反应得到Tf-DOX复合物；将羧基化的纳米钻石和Tf-DOX复合物反应得到纳米钻石靶向药物ND-(Tf-DOX)。该靶向药物与HepG2作用，用低温、不同抑制剂和游离Tf处理细胞，表明其具有能量依赖；用人正常HEK293做对比，研究细胞对其吸收，表明其具有靶向选择性；用人HepG2和人HeLa做对比，MTT法检测其细胞毒性，表明其对癌细胞具有靶向抗肿瘤效应和选择性；以荷瘤小鼠为模型，研究其在体内的抑制肿瘤效应，表明其能抑制肿瘤并相对阿霉素具有较低毒副作用。其可在制备靶向抗肿瘤药物中应用。

主权项

一种转铁蛋白修饰的纳米钻石靶向药物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)按每1mg转铁蛋白Tf溶于1mL PBS缓冲溶液中，接着按Tf与DOX质量比100︰6‑10加入DOX，摇匀，室温下避光，在摇匀仪上反应过夜得到Tf‑DOX复合物；(2)称取干燥的羧基化的纳米钻石，按每毫克羧基化的纳米钻石加入1‑1.5ml浓度为0.1M pH6.00的MES缓冲溶液中，超声分散形成悬浊液，再按每毫克羧基化的纳米钻石中加入0.2mg EDC与0.3mg NHS，室温搅拌反应6h，以15000rpm离心5min，除去上清液，继而用pH 7.4 PBS缓冲液洗涤两次，弃去上清液，得到活化羧基的纳米钻石沉淀物；把活化羧基的纳米钻石沉淀物重新分散到pH7.4的PBS缓冲液溶液中，超声分散形成悬浊液，加入制备的Tf‑DOX复合物，室温下避光在摇匀仪上反应12h；然后于15000rpm离心5min，用PBS缓冲液清洗沉淀直至上清液无色为止，制得转铁蛋白修饰的纳米钻石靶向药物ND‑(Tf‑DOX)，冷藏。