高亲和性化合物结合常数的测定方法

摘要

本发明涉及所关注的化合物与蛋白质的结合常数的测定方法，其包括下列步骤：a)将高亲和性化合物加入到双室系统中，其中两个室通过半透膜隔离开，所述的半透膜可渗透所关注的化合物；和测定在达到分布平衡后所关注的高亲和性化合物在所述室之一中的量；b)将浸入化合物加入到所述室之一中，其中浸入化合物不能透过膜，和在达到分布平衡后测定所关注的高亲和性化合物与浸入化合物的测定分配系数；c)将非特异性蛋白质加入到另一室中，其中非特异性蛋白质不能透过膜，和在达到分布平衡后在浸入化合物的存在下测定所关注的化合物与非特异性蛋白质的分配系数；和d)使用步骤b)和c)的分配系数测定测试化合物的结合常数。

主权项

所关注的高亲和性化合物与非特异性蛋白质的结合常数的测定方法，其包括下列步骤：a)将高亲和性化合物加入到两‑室系统中，其中两室被可透过所关注的高亲和性化合物的半透膜隔离开，和在达到分布平衡后测定所述室之一内所关注的高亲和性化合物的量；b)将浸入化合物加入到所述室之一中，其中浸入化合物不能透过半透膜，和在达到分布平衡后测定所关注的高亲和性化合物与浸入化合物的分配系数；c)将非特异性蛋白质加入到另一室中，其中非特异性蛋白质不能透过半透膜，和在达到分布平衡后在浸入化合物的存在下测定所关注的高亲和性化合物与非特异性蛋白质的分配系数；和d)使用步骤b)和c)的分配系数测定测试化合物的结合常数，其中高亲和性化合物是指在生理条件下和血浆蛋白剩余物的存在下总量的至少95％结合所述血浆蛋白的化合物，其中浸入化合物是一种物质，其显著降低高亲和性测试物质与非特异性蛋白质的亲和性，显著降低亲和性指的是在浸入化合物的存在下和其不存在结合的测试物质与非特异性蛋白质的量之差具有统计学相关性，其中p≤0.05，其中测试化合物是指高亲和性化合物。