GC-MS研究灰葡萄孢菌代谢组的样品前处理及检测方法

摘要

本发明公开了一种基于气相色谱-质谱联用(GC-MS)研究灰葡萄孢菌代谢组的样品前处理方法和代谢组检测方法。本发明提供的对灰葡萄孢菌样品前处理方法如下：在铺有玻璃纸的PDA平板上培养灰葡萄孢菌，培养2～4d(优选3d)后收集菌丝，液氮灭活后超低温冰箱保存备用。冷冻研磨破碎菌丝样品，代谢组提取采用冷冻过的甲醇水混合物以使酶失活。离心干燥后，经过肟化(或腙化)和硅烷化两步衍生化反应后用于GC-MS检测。本发明还提供了利用GC-MS对上述样品进行的检测方法，检测条件如下：选用HP-5MS毛细管柱(30m×0.25mm×0.25μm)；进样量1μL；程序升温；离子源温度230℃，全扫描范围m/z20～650。采用本发明的提取及检测方法能得到重现性较好的代谢组检测结果。

主权项

灰葡萄孢菌代谢组样品前处理方法，包括以下方法并依次进行：菌丝的培养、收集、灭活、保存、代谢组的提取、干燥和衍生化。