利用吸水链霉菌生产雷帕霉素的方法

摘要

本发明公开一种利用吸水链霉菌生产雷帕霉素的方法，将吸水链霉菌新鲜斜面用甘油与吐温80洗下，过滤，将过滤后的单孢子原液加水，加入灭菌的LiCl水溶液，在摇床作用6小时后立即取出，置于紫外灯下照射；紫外光光照射处理后，孢子液于4℃避光放置，转入可见光下，稀释涂布于LiCl的分离培养基平皿上，25℃培养；将在分离培养基平皿上的单菌落接种在葡萄糖天门冬素培养基上培养；再经过种子培养基培养、液体发酵培养基发酵。本发明利用紫外光处理、光复活和暗修复等方法中菌体效价与发酵上清液效价呈中等程度以上的正相关性，提高菌株的变异几率。在这种情况下可以用测定发酵上清液效价取代测定菌体效价来进行初筛工作，以排除大量低产型菌落。

主权项

一种利用吸水链霉菌生产雷帕霉素的方法，其特征在于，步骤如下：1)将吸水链霉菌新鲜斜面用20％甘油与0.1％吐温80洗下，过滤，将过滤后的单孢子原液加水至10ml，按0.85％终浓度加入灭菌的LiCl水溶液，在28℃摇床作用6小时后取出，置于波长253.7nm、功率30W的紫外灯下30cm处开盖振摇照射；紫外光光照射处理后，孢子液于4℃避光放置24h，转入可见光下，稀释涂布于0.5％LiCl的分离培养基平皿上，于25℃培养20天；2)将在分离培养基平皿上长好的单菌落接种在葡萄糖天门冬素培养基斜面上，于25℃培养15天后进行液体发酵；3)于250ml三角瓶内装50m1种子培养基，由斜面按种后于28℃振摇培养48小时；4)于500ml三角瓶内装50‑100ml液体发酵培养基，由种子以5％接种量转种后于25℃振摇培养96小时，结束发酵。