发明名称 一种具有降氨氮能力的光合细菌的筛选方法
摘要 本发明公开了一种具有降氨氮能力的光合细菌的筛选方法,该菌株筛选于青岛胶南市大朱山嘴海域,具有较高的氨氮降解能力,生理生化鉴定为红假单胞菌属(Rhodopseudomonas)光合细菌。本发明还公开了降氨氮海水光合细菌的筛选方法。将该菌株用于水产养殖水质改善及生活污水的处理,针对养殖水体或生活污水氨氮含量高的问题,针对性强,应用成本低。
申请公布号 CN104388360A 申请公布日期 2015.03.04
申请号 CN201410719594.1 申请日期 2014.12.03
申请人 青岛根源生物技术集团有限公司 发明人 梁晶晶;谢金萍;王娇
分类号 C12N1/20(2006.01)I;C12R1/01(2006.01)N 主分类号 C12N1/20(2006.01)I
代理机构 青岛致嘉知识产权代理事务所 37236 代理人 王晓晓
主权项 一种具有降氨氮能力的光合细菌的筛选方法,其特征在于:筛选步骤包括:a、取样:泥水混合样取于青岛胶南市大朱山嘴海域,在低温下带回实验室;b、富集培养基配制:1000 毫升海水加入:5克NH<sub>4</sub>Cl、1‑5克CH<sub>3</sub>COONa、0.2克MgSO<sub>4</sub>·7H<sub>2</sub>O、0.2克酵母膏、0.1‑0.3 克蛋白胨,调pH到7.0,121℃灭菌30min;灭菌后加入: 5%的NaHCO<sub>3</sub>溶液加20毫升、5%的KH<sub>2</sub>PO<sub>4</sub>溶液4毫升;c、富集:在无菌条件下接种10%泥水混合样于含有b所述培养基的锥形瓶中,用不透气橡胶塞密封,28℃±1℃静置培养,光照强度36µE·m<sup>‑2</sup>·s<sup>‑1</sup>,光暗比15h:9h,每天摇动混合一次;培养7天后,取部分富集液按10%转接至新鲜的b培养基中,如上条件中再次富集培养7天;共转接三次获得最终富集液;d、分离纯化培养基配制:1000 毫升海水加入0.1克NH<sub>4</sub>Cl,0.3 克CH<sub>3</sub>COONa,0.02 克MgSO<sub>4</sub>·7H<sub>2</sub>O,0.1克酵母膏,18克琼脂,pH值7.0, 121℃灭菌30min;灭菌后加入0.2克 NaHCO<sub>3</sub>,0.02 克 K<sub>2</sub>HPO<sub>4</sub>;e、分离纯化:在无菌环境下,移取1ml富集液于无菌培养皿中,倾注冷却至50‑55℃的d所述培养基,缓慢摇匀,静置凝固;再倾注一层上层培养基进行密封;28℃±1℃静置培养,光照强度36µE·m<sup>‑2</sup>·s<sup>‑1</sup>,24h光照培养箱中培养,通过观察,挑取红色单菌落,重复在d所述培养基中进行划线分离,获得红假单胞菌属光合细菌。
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