一种采用逆流色谱技术一步纯化大蒜多糖的方法

摘要

本发明是一种以新鲜大蒜为原料制备和纯化大蒜多糖的一种采用逆流色谱技术一步纯化大蒜多糖的方法；本发明通过洗涤去杂，破碎浸提等步骤，得大蒜粗提液，经大孔树脂处理，洗脱得大蒜多糖粗提液，再经逆流色谱一步纯化得大蒜多糖精品。本方法实现了一步纯化制备高纯度大蒜多糖的理想；该方法采用逆流色谱技术纯化大蒜多糖不仅能够实现纯度高、操作简单、效率高、价格低，而且还优化了制备高纯度大蒜多糖的提取工艺，为规模分离纯化大蒜多糖精品提供技术支持，有很好的推广应用价值。

主权项

一种采用逆流色谱技术一步纯化大蒜多糖的方法，其特征在于包括如下步骤：A. 洗涤去杂：将新鲜大蒜去皮，洗去杂质；B. 破碎浸提浓缩：将洗净的大蒜破碎，用75%的乙醇水溶液超声循环提取2次，两次提取液合并浓缩；C. 大蒜多糖粗提液经大孔树脂处理：将浓缩液复溶上DA201极性大孔树脂柱，上样量为柱体积的10%，用水作淋洗液，浓缩流出液；D. 经逆流色谱一步纯化大蒜多糖：逆流色谱溶剂系统为MgSO₄:PEG:H₂O，硫酸镁的百分含量为14～18%，PEG（聚乙二醇）分子量为1000～1500，含量为12%～15%；配置好的溶剂放入分液漏斗中，静止过夜，取上相作为固定相，下相作为流动相；逆流色谱仪柱温为25℃，转速为800～1000r/min，转向为正向；用上下相1：1的溶液对浓缩液进行稀释，使多糖含量为1～2mg/mL；上样体积为柱体积的1/10～1/20；定时或定量进行收集，对收集到的各管采用硫酸—苯酚法进行多糖测定；E. 透析及干燥：将适量体积的上述收集液装入截留分子量为3000的透析袋中，对水透析过夜，将透析过的溶液进行冷冻干燥，得大蒜多糖精品。