一种改良的干/祖细胞与新生猪胰岛细胞共培养的方法

摘要

本发明公开了一种改良的干/祖细胞与新生猪胰岛细胞共培养的方法。将NICCs用完全培养基培养至第三天，以每NICCs(IEQ)：EPCs(P3-P5)(个)：MSCs(P3-P5)(个)为1:8:8-1：12:12的细胞比例，用完全培养基重悬三种细胞，并置于不贴壁培养皿或者培养瓶内，37℃恒温箱共培养8-12小时，期间无需摇荡，最后将细胞移入装有培养基的面积约为前培养皿或者培养瓶6倍的培养皿或培养瓶中继续培养，隔天换液一次。本发明方法的MSCs、EPCs包被NICCs效率增加；降低了细胞凋亡率，增加了细胞活率，提高了培养细胞的产量；建立了简单、稳定、高效的干细胞与新生猪胰岛细胞共培养改良方法。

主权项

一种改良的人干/祖细胞与新生猪胰岛细胞共培养的方法，其特征在于：包括以下步骤：1)新生猪胰岛细胞培养至少至第三天；2)浓缩培养：用培养基重悬新生猪胰岛、内皮祖细胞和间充质干细胞三种细胞，根据每2万IEQ新生猪胰岛重悬至6‑10ml培养基中，再放入6cm培养皿的比例，将细胞混合液置于培养皿或不贴壁的培养瓶内共培养至少8小时；3)然后将细胞移入装有新配制的培养基的培养皿或不贴壁的培养瓶中继续培养，使用的培养皿或者培养瓶面积是步骤2)浓缩培养时使用的至少6倍，培养基为4‑6倍。