用于癌细胞捕获的叶酸修饰的静电纺纳米纤维的制备方法

摘要

本发明涉及一种用于癌细胞捕获的叶酸修饰的静电纺纳米纤维的制备方法，包括：（1）静电纺醋酸纤维素纳米纤维的制备并干燥；（2）醋酸纤维素纳米纤维水解，得到再生纤维素纳米纤维，干燥；（3）将聚电解质聚二甲基二烯丙基氯化铵PDADMAC和聚丙烯酸PAA组装在静电纺再生纤维素纳米纤维表面，得到聚电解质自组装纳米纤维，干燥；（4）将G5.NH₂-FI-FA修饰到聚电解质自组装纳米纤维表面；（5）将修饰在聚电解质自组装纳米纤维表面G5.NH₂-FI-FA的剩余氨基全部转化为乙酰基。本发明制备的癌细胞捕获材料具有制备工艺简单、特异性强、可短时间内靶向捕获癌细胞等优点，在癌症的早期诊断方面具有很好的应用前景。

主权项

一种用于癌细胞捕获的叶酸修饰的静电纺纳米纤维的制备方法，包括： (1)将醋酸纤维素溶于有机溶剂中，搅拌，得到纺丝液进行纺丝，干燥，得醋酸纤维素纳米纤维，其中醋酸纤维素和有机溶剂的质量体积比为1g：5ml；其中醋酸纤维素的M_n为30,000；有机溶剂为体积比为2:1的丙酮和N,N‑二甲基甲酰胺的混合液；纺丝工艺条件为：电压为20‑22kV，接收距离为25cm，流速为1mL/h，环境湿度40‑50％；所述的干燥为真空干燥，干燥时间为12‑24h； (2)将上述醋酸纤维素纳米纤维在碱性条件下进行水解1‑8h，洗涤，干燥，得到再生纤维素纳米纤维；其中碱性条件为0.05M的NaOH/乙醇溶液，水解时间为4h； (3)依次将聚电解质聚二甲基二烯丙基氯化铵PDADMAC和聚丙烯酸PAA组装在静电纺再生纤维素纳米纤维表面，得到聚电解质自组装纳米纤维；其中组装方法为：分别配制聚二甲基二烯丙基氯化铵PDADMAC/NaCl溶液和聚丙烯酸PAA/NaCl溶液，调节pH值为3.5，然后将再生纤维素纳米纤维浸泡在PDADMAC/NaCl溶液，取出后洗涤，吸干表面流动水，再浸泡在PAA/NaCl溶液中，洗涤，真空干燥，得到聚电解质自组装纳米纤维；其中PDADMAC与PAA在再生纤维素纳米纤维表面组装层数各为1层； (4)将第五代聚酰胺‑胺树状大分子的DMSO溶液中，逐滴滴加含有异硫氰酸荧光素FITC的DMSO溶液，搅拌反应1‑2d，然后加入EDC活化3‑5h后的叶酸FA的DMSO溶液，搅拌反应3‑5d，得到FITC与FA修饰的树状大分子溶液，最后将溶液进行透析，冷冻干燥，即得G5.NH₂‑FI‑FA，然后配制成溶液； (5)配制聚电解质自组装纳米纤维溶液，加入EDC活化3‑5h，然后逐滴加入G5.NH₂‑FI‑FA溶液，避光，振荡，得G5.NH₂‑FI‑FA修饰后的聚电解质自组装纳米纤维；其中G5.NH₂‑FI‑FA在溶液中的最终浓度为0.2‑1.2mg/mL； (6)将上述G5.NH₂‑FI‑FA修饰后的聚电解质自组装纳米纤维中加入三乙胺，反应30‑60min，再加入乙酸酐，继续反应12‑24h，即得具有靶向捕获癌细胞功能的纳米纤维材料，其中，三乙胺及乙酸酐与树状大分子的摩尔比控制在550：550：1。