重组SIV gag与肠道病毒EV71型VP1融合基因的病毒样颗粒及其制备方法和应用

摘要

本发明公开了一种重组SIV gag与肠道病毒EV71型VP1融合基因的病毒样颗粒及其制备方法和应用，属于免疫技术领域。本发明利用重组PCR法制备得到SIV gag与肠道病毒EV71型VP1基因的融合基因gag-VP1，并证实该融合基因能够在体外有效表达。利用SIV gag能够自我组装成病毒样颗粒的特性，首次利用gag-VP1杆状病毒制备了gag-VP1病毒样颗粒。本发明利用杆状病毒表达系统制备含有gag与肠道病毒EV71 VP1融合基因的病毒样颗粒，制备过程简便，易纯化，产量相对较大，有望为新型手足口病疫苗的研发奠定实验室基础。

主权项

一种重组SIV gag与肠道病毒EV71型VP1融合基因的病毒样颗粒，其特征在于，该病毒样颗粒是将融合基因gag‑VP1克隆到真核表达载体及杆状病毒转座载体中分别得到真核表达载体和重组转座载体，然后真核表达载体转染哺乳动物细胞，重组转座载体转化DH10Bac感受态细胞制得重组杆粒，将重组杆粒转染TN5昆虫细胞，经分泌表达制得；其中，所述融合基因gag‑VP1是以重叠PCR法获得的SIV gag与EV71 VP1的融合基因，且融合基因gag‑VP1的核苷酸序列如SEQ.ID.NO.1所示。