发明名称 | 利用人参端粒长度鉴别人参年限的方法 | ||
摘要 | 本发明公开了一种利用人参端粒长度鉴别人参年限的方法。该方法包括如下步骤:A)建立数学模型:a1)取若干已知年限人参位于芦头以下1~2cm处的样品,分别提取基因组DNA;a2)以各基因组DNA为模板,用特异于人参端粒和人参单拷贝基因的2个引物对分别进行qPCR,所得Ct值分别记为T和S;a3)针对每个人参,计算T/S;a4)以人参年限数值为横坐标,T/S为纵坐标,制作线性标准曲线,获得曲线方程;B)采用所得数学模型鉴别待测人参年限:按步骤a1)-a3)操作,获得待测人参T/S,将其代入数学模型,得待测人参的年限。该方法测定的人参年限与实际年限吻合度极高,且低成本,高通量,相比传统Southern印迹法测量人参端粒长度,本发明对DNA的需求量更少,试验周期更短。 | ||
申请公布号 | CN104357560A | 申请公布日期 | 2015.02.18 |
申请号 | CN201410602212.7 | 申请日期 | 2014.10.31 |
申请人 | 中国中医科学院中药研究所 | 发明人 | 黄璐琦;蒋超;袁媛;王尧龙 |
分类号 | C12Q1/68(2006.01)I | 主分类号 | C12Q1/68(2006.01)I |
代理机构 | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人 | 关畅 |
主权项 | 一种鉴别人参年限的方法,包括如下A和B的步骤:A.按照包括如下步骤(a1)‑(a4)的方法获得用于鉴别人参年限的数学模型:(a1)取若干已知年限人参位于芦头以下1~2cm处的样品,分别提取基因组DNA;(a2)以步骤(a1)获得的若干已知年限人参的基因组DNA分别作为模板,用特异于人参端粒的引物对1进行实时荧光定量PCR扩增,得到所述人参端粒的Ct值,记为T;用特异于人参单拷贝基因的引物对2进行实时荧光定量PCR扩增,得到所述人参单拷贝基因的Ct值,记为S;(a3)针对每个已知年限人参,计算所述人参端粒的Ct值与所述人参单拷贝基因的Ct值之间的比值,即T/S比值;(a4)以所述若干已知年限人参的年限数值为横坐标,以对应的所述T/S比值为纵坐标,制作线性标准曲线,所得线性标准曲线方程即为所述用于鉴别人参年限的数学模型;B.采用步骤A所得数学模型按照包括如下步骤(b1)‑(b2)的方法对待测人参的年限进行鉴别:(b1)按照步骤(a1)‑(a3)进行操作,仅采用所述待测人参替代所述若干已知年限人参,获得所述待测人参的T/S比值;(b2)将步骤(b1)获得的所述待测人参的T/S比值代入步骤A获得的所述数学模型中,从而获得所述待测人参的年限。 | ||
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