一种阳离子化丝素蛋白、制备方法及其应用

摘要

本发明公开了一种阳离子化丝素蛋白、制备方法及其应用，属生物医用材料技术领域。本发明采用低分子量的聚乙烯亚胺，通过酪氨酸酶催化氧化的方法，对丝素蛋白进行修饰，将PEI接枝到丝素蛋白的酪氨酸残基侧链，改性后的丝素蛋白在生理环境下带正电荷，能与带负电荷的DNA产生静电结合，形成阳离子化丝素蛋白-DNA二元复合物，可作为非病毒转基因传递载体用于基因转染。本发明提供的阳离子化丝素蛋白的细胞毒性低，制备方法的反应条件温和，克服了高分子量的PEI不可降解的问题，开拓了阳离子化丝素蛋白在基因治疗领域的应用前景。

主权项

一种阳离子化丝素蛋白的制备方法，将蚕丝进行脱胶、溶解、透析处理后得到再生丝素蛋白溶液，其特征在于再进行如下步骤的加工：（1）将聚乙烯亚胺溶于磷酸盐缓冲溶液中，配制浓度为1～20 mg/mL的溶液，再滴加盐酸溶液，调节pH为6.0～6.8，得到弱酸化的聚乙烯亚胺溶液；（2）在20～25℃的水浴条件下，将弱酸化的聚乙烯亚胺溶液与浓度为1～20 mg/mL的丝素蛋白溶液混合，丝素蛋白与聚乙烯亚胺按质量比为100：（1～64），充分搅拌得到混合溶液；（3）将酪氨酸酶溶于磷酸盐缓冲溶液中，配制浓度为0.1～2 mg/mL的酪氨酸酶溶液，滴加到步骤（2）得到的混合溶液中，在温度为20～25℃的条件下反应12～24 h，反应液经葡聚糖凝胶柱层析处理后，进行离心处理，再经脱盐、纯化，得到聚乙烯亚胺修饰的阳离子化丝素蛋白溶液。