一种高速逆流色谱和高效液相色谱联用制备高纯度聚戊烯醇类脂的方法

摘要

本发明公开了一种高速逆流色谱和高效液相色谱联用制备高纯度聚戊烯醇类脂的方法，以银杏叶、松针叶和桑叶为原料，用无水丙酮或无水C1～C3的醇为提取溶剂，在低温微波或超声波提取，制备聚戊烯醇软膏。以正己烷、乙腈和丙酮等溶剂按比例混合作为高速逆流溶剂体系，混合充分后静置，上相为固定相，下相为流动相，取聚戊烯醇类脂软膏溶于下相中作为供试品，将固定相充满高速逆流色谱仪的分离柱，设定在500～1000r/min转速下，以1～5mL/min的流速注入流动相，在波长210～230nm的紫外检测器检测，离心过程先用正相离心旋转180～240min，再用反相离心旋转30～60min，待流动相开始流出色谱柱时，收集馏出液，将不同组分收集合并，经HPLC检测，制备纯度为60～90％的聚戊烯醇类脂。

主权项

一种高速逆流色谱和高效液相色谱联用制备高纯度聚戊烯醇类脂的方法，其特征在于由以下步骤组成：第一步，聚戊烯醇类脂提取将富含聚戊烯醇类脂的新鲜植物叶子，室温阴干，破碎至100目以下粉末，加入无水丙酮或C1～C3醇中任一种溶剂，叶子与溶剂按质量比为1∶8～30，在室温～80℃浸泡10～72小时，或经微波提取或超声波提取10～60分钟，提取两次，合并提取液，真空回收有机溶剂，浓缩物为聚戊烯醇类脂软膏，聚戊烯醇类脂含量5～20％；第二步，高速逆流色谱分离1)按体积比选择正己烷∶乙腈∶丙酮＝3～4∶0.5～1∶0.8～1.5溶液作为高速逆流萃取溶剂体系，三种溶剂混合充分后静置，按上下两相分开，取上相为固定相，下相为流动相，超声脱气；2)取聚戊烯醇类脂软膏溶于下相中作为供试样品，所述聚戊烯醇的软膏与下相的质量体积比为1g∶20mL～80mL；3)将固定相充满高速逆流色谱仪的多层线圈分离柱，高速逆流色谱仪分离条件在500～1000r/min转速下，以1～5mL/min的流速注入流动相，在波长210～230nm的紫外检测器检测，当明显有流动相流出时，开始供试样品溶液进样，整个离心过程先采用正相离心旋转，时间为180～240min，再采用反相离心旋转，时间为30～60min，用自动馏分收集器收集馏出液；第三步，高效液相色谱检测将第二步自动馏分收集器收集馏出液，用高效液相色谱进行检测聚戊烯醇类脂部位集分，合并聚戊烯醇类脂集分，回收有机溶剂，浓缩物为黄色聚戊烯醇类脂油状物，聚戊烯醇类脂含量60％～90％。