发明名称 电穿孔转染干扰RNA到细粒棘球绦虫的方法
摘要 本发明公开了电穿孔转染干扰RNA到细粒棘球绦虫的方法,包括下述步骤:1)细粒棘球蚴原头节在含有青霉素和链霉素的RPMI1640培养基中培养1-5天;2)清洗培养后的细粒棘球蚴原头节,将其加入到RPMI1640培养基中,接着加入电转缓冲液、干扰RNA到电极杯中,利用电转仪对细粒棘球蚴原头节进行转染;3)转染好的细粒棘球蚴原头节静置后转移至含有RPMI1640培养基的无菌培养皿中,在孵育箱内培养。上述方法进一步还包括通过RT-PCR检测转染后细粒棘球蚴原头节内GRP78mRNA表达水平,Western blot检测转染后细粒棘球蚴原头节内GRP78蛋白表达水平,鉴定转染效果。观察结果显示,本发明利用电穿孔方法成功实现了转染干扰RNA到细粒棘球绦虫。
申请公布号 CN104342456A 申请公布日期 2015.02.11
申请号 CN201410571966.0 申请日期 2014.10.23
申请人 姜玉峰 发明人 姜玉峰;吕海龙;李思源
分类号 C12N15/87(2006.01)I;A01K67/033(2006.01)I 主分类号 C12N15/87(2006.01)I
代理机构 北京方圆嘉禾知识产权代理有限公司 11385 代理人 董芙蓉
主权项 电穿孔转染干扰RNA到细粒棘球绦虫的方法,包括下述步骤:1)细粒棘球蚴原头节在含有青霉素和链霉素的RPMI 1640培养基中培养1‑5天;2)清洗培养后的细粒棘球蚴原头节,将其加入到RPMI 1640培养基中,接着加入电转缓冲液、干扰RNA到电极杯中,利用电转仪对细粒棘球蚴原头节进行转染;3)转染好的细粒棘球蚴原头节静置后转移至含有RPMI 1640培养基的无菌培养皿中,在孵育箱内培养。
地址 832002 新疆维吾尔自治区石河子市北二路32小区石河子大学医学院组胚教研室