一种利用基因工程改造酶制备萜类化合物的方法

摘要

本发明公开了一种解决上述技术问题的利用基因敲除技术把赤霉素真菌的ent-贝壳杉烯酸氧化酶基因敲除,导致这种酶无法在赤霉素真菌内表达,从而避免ent-贝壳杉烯酸转换成赤霉素A12（GA12），进而把积累的ent-贝壳杉烯酸转换成甜菊醇的方法。本发明的应用和实施使其其显著的技术效果主要体现在：真菌发酵生产赤霉素已是成熟稳定的工艺,其菌株是赤霉素高产量的生产菌株，本发明思路新颖，巧妙地利用了已经成熟的赤霉素生产通路，以获得自然界产量极少的两种萜类化合物：甜菊醇及ent-贝壳杉烯酸，产量远高于国外同行报道，具有很高的应用价值。

主权项

一种利用基因工程改造酶制备萜类化合物的方法，其特征在于，该方法包括：载体构建中包含ent‑贝壳杉烯酸氧化酶基因的敲除或/和优化后的ent‑贝壳杉烯酸羟化酶基因的插入，所述的萜类化合物是ent‑贝壳杉烯酸、甜菊醇、莱鲍迪甙A，莱鲍迪甙B，莱鲍迪甙C，莱鲍迪甙D，莱鲍迪甙E，莱鲍迪甙F或莱鲍迪甙M。