一种用于基因治疗的超分子纳米组装体及其制备方法

摘要

一种用于基因治疗的超分子纳米组装体，其构筑单元以环糊精修饰的金纳米粒子为主体，蒽修饰的金刚烷为客体，通过主-客体包结作用构筑超分子组装体；其制备方法是：1）制备金纳米粒子；2）制备N-（9-甲蒽基）-N'-金刚烷甲酰胺基乙基乙二胺；3）将上述制得的金纳米粒子与N-（9-甲蒽基）-N'-金刚烷甲酰胺基乙基乙二胺溶解入水中，均匀混合后即可制得溶液态超分子纳米组装体。本发明的优点是：该超分子纳米组装体能够有效地诱导DNA凝聚，其凝聚能力可以很方便地通过控制主客体投入比来调节，在基因治疗领域有着广泛的应用前景；其制备方法简单，组分间具有较强的键合能力，为基因治疗提供了一种新的制备基因载体的方法。

主权项

一种用于基因治疗的超分子纳米组装体的制备方法，所述超分子纳米组装体构筑单元以环糊精修饰的金纳米粒子为主体，蒽修饰的金刚烷为客体，通过主‑客体包结作用构筑超分子组装体，其特征在于制备步骤如下：1）在氩气保护下，将溶有6‑硫辛酰胺‑6脱氧β‑环糊精和硼氢化钠的二甲基亚砜溶液和溶有氯金酸的二甲基亚砜溶液快速混合，室温下避光搅拌24小时，然后加入乙腈使产品析出，离心分离固体并用二甲基亚砜和乙腈的混合溶液洗涤8‑10次，在0.1MPa下真空干燥后得到红棕色金纳米粒子固体；2）将9‑蒽醛和二乙烯三胺加入体积比为5:3的无水乙醇和二氯甲烷的混合溶剂中，室温搅拌24小时后，加入硼氢化钠，继续搅拌8小时，减压除去溶剂，残留物用蒸馏水洗涤后用二氯甲烷萃取，有机相用无水硫酸钠干燥后，减压除去溶剂，0.1MPa下真空干燥得到固体，将所得固体与1‑金刚烷酰氯溶解于20 mL无水二氯甲烷中，然后加入三乙胺，氩气保护下室温搅拌8小时后，减压除去溶剂，残留物以体积比10：1的二氯甲烷和甲醇混合溶剂作为淋洗剂，采用硅胶薄层色谱法分离得到1.27克白色固体N‑（9‑甲蒽基）‑N'‑金刚烷甲酰胺基乙基乙二胺产品；3）将上述制得的红棕色金纳米粒子固体与N‑（9‑甲蒽基）‑N'‑金刚烷甲酰胺基乙基乙二胺溶解入水中，均匀混合后即可制得溶液态超分子纳米组装体；其中步骤1）中，6‑硫辛酰胺‑6脱氧β‑环糊精、硼氢化钠、氯金酸、二甲基亚砜和乙腈用量比为1mmol：5mmol：100mmol：4.5L：4.5L，混合溶液中二甲基亚砜与乙腈的体积比为1：1；其中步骤2）中，9‑蒽醛、二乙烯三胺、无水乙醇和二氯甲烷的混合溶剂、硼氢化钠的用量比为1.1克：2.7 mL：200 mL：1.9克；9‑蒽醛、1‑金刚烷酰氯、无水二氯甲烷和三乙胺的用量比为1.1克：1.0克：20 mL：2.1 mL；其中步骤3）中，金纳米粒子在水中的浓度为0.62 g/L，N‑（9‑甲蒽基）‑N’‑金刚烷甲酰胺基乙基乙二胺在水中的浓度为1×10^‑6‑2×10^‑4 mol/L。