从植物芜青中提取纯化分离制备一种天然吡咯衍生物的方法

摘要

本发明涉及从植物芜青（BrassicarapaL.）中提取、分离纯化制备一种天然吡咯衍生物即4-（甲酰基-5-羟甲基-1氢-吡咯-1-基）丁酸的方法，属于天然产物提取领域。目前国内外天然提取4-（甲酰基-5-羟甲基-1氢-吡咯-1-基）丁酸的方法都存在得率低，方法繁琐复杂，成本较高等不足之处。本发明提供了一种从植物芜青中提取、分离纯化获得纯度高于98%的4-（甲酰基-5-羟甲基-1氢-吡咯-1-基）丁酸的方法。本发明对芜青的深加工，提升其附加值具有意义，提取方法操作简便、产品得率和纯度高、成本较低。

主权项

从植物芜青中提取分离纯化制备一种天然吡咯衍生物即4‑（甲酰基‑5‑羟甲基‑1氢‑吡咯‑1‑基）丁酸的方法，其特征是采用下述方法之一：方法（一），其主要步骤如下：（1）取干燥芜青全株500g，粉碎后过60目筛；（2）加入5000ml用冰乙酸调节PH值为3.2的75%体积分数乙醇水溶液浸泡30min后 ，超声波在180w、25℃、40kHz条件下超声提取30min，过滤，滤渣加入5000ml75%体积分数乙醇水溶液后超声波在180w、25℃、40kHz条件下超声提取30min，过滤，弃去滤渣，合并两次提取滤液，用旋转蒸发仪浓缩滤液至粘稠浸膏状，得提取物浸膏；（3）提取物浸膏用500ml蒸馏水溶解，等体积加入乙酸乙酯萃取4次，合并乙酸乙酯萃取相，减压蒸发脱去乙酸乙酯溶剂，得粗制品；（4）将步骤3中所述的粗制品200mg溶于5ml水中，使用制备高效液相色谱进行精制：色谱柱填料：C18键合硅胶柱 250mm*30mm流动相A相为：PH=3的冰乙酸水溶液流动相B相为：甲醇梯度程序为：0~5min，A：5%，B：95%      5~35min, A：25%，B：75%      35~40min, A：5%，B：95%流速:30ml/min柱温：25℃检测波长：290nm；（5）根据计算机实时采集的色谱图收集4‑（甲酰基‑5‑羟甲基‑1氢‑吡咯‑1‑基）丁酸色谱峰流出片段；（6）按步骤5中所述方法，重复制备步骤3中所述的粗制品，合并4‑（甲酰基‑5‑羟甲基‑1氢‑吡咯‑1‑基）丁酸色谱峰流出片段，减压浓缩脱去溶剂得精制4‑（甲酰基‑5‑羟甲基‑1氢‑吡咯‑1‑基）丁酸；方法（二），其主要步骤如下：（1）取干燥芜青块根500g，粉碎后过80目筛；（2）加入15000ml PH=5.0的盐酸水溶液浸泡7天后 ，过滤，弃去滤渣，滤液用旋转蒸发仪浓缩滤液至粘稠浸膏状，得提取物浸膏；（3）提取物浸膏用1000ml蒸馏水溶解，等体积加入乙酸乙酯萃取8次，合并乙酸乙酯萃取相，减压蒸发脱去乙酸乙酯溶剂，得粗制品；（4）将步骤3中所述的粗制品300mg溶于5ml水中，使用制备高效液相色谱进行精制：色谱柱填料：C8键合硅胶柱250mm*30mm流动相A相为：PH=6.4的20mmol/L的甲酸铵水溶液流动相B相为：乙腈梯度程序为：0~5min，A：2%，B：98%      5~15min, A：15%，B：85%      15~20min, A：2%，B：98%流速:40ml/min柱温：30℃检测波长：280nm；（5）根据计算机实时采集的色谱图收集4‑（甲酰基‑5‑羟甲基‑1氢‑吡咯‑1‑基）丁酸色谱峰流出片段；（6）按步骤5中所述方法，重复制备步骤3中所述的粗制品，合并4‑（甲酰基‑5‑羟甲基‑1氢‑吡咯‑1‑基）丁酸色谱峰流出片段减压浓缩脱去溶剂，得精制4‑（甲酰基‑5‑羟甲基‑1氢‑吡咯‑1‑基）丁酸。