与小麦小穗数主效基因位点紧密连锁的分子标记及其获取方法和应用

摘要

本发明公开了一种与小麦小穗数主效基因位点紧密连锁的分子标记，采用标记引物Xbarc192和Xbarc253对小麦品种京411的DNA进行PCR扩增，扩增产物在8%聚丙烯酰胺凝胶上电泳分离后，获得的扩增产物的分子量分别为200bp和186bp，即为小麦小穗数主效基因位点QTss.cas-7A的分子标记。本发明所提供的小麦小穗数主效基因位点的分子标记可用于检测小麦品种或品系中是否含有增加小穗数的主效基因位点QTss.cas-7A，以便快速筛选出具有该基因位点的小麦品种或品系用于育种，可大大加快小麦高产品种的选育进程。

主权项

一种与小麦小穗数主效基因位点QTss.cas‑7A紧密连锁的分子标记用于检测小麦品种或品系的方法，其特征在于，该分子标记为Xbarc192和Xbarc253，其所述分子标记Xbarc192的上游引物序列如SEQ ID NO:1所述、下游引物序列如SEQ ID NO:2所述；所述分子标记Xbarc253的上游引物序列如SEQ ID NO:3所述、下游引物序列如SEQ ID NO:4所述；用Xbarc192和Xbarc253的标记引物对待测小麦品种或品系的DNA分别进行PCR扩增，其PCR扩增体系为20 μl，包括：10 μmol/L的上、下游引物各1.0 μl，10×Buffer 2.0 μl，25 mmol/L的 Mg²⁺ 1.2 μl，5 U/μl 的Taq酶0.2 μl，2.5 mmol/L的dNTP 0.6 μl，30 ng/μl的DNA 2.0 μl，其余用ddH₂O补足；PCR扩增程序为：94℃预变性7 min；94℃变性30 s，50℃退火45 s，72℃延伸60 s，34个循环；72℃后延伸7 min；最后10℃终止反应；将上述扩增产物分别在8%聚丙烯酰胺凝胶上电泳分离后，如Xbarc192的扩增产物中分子量大小为200 bp的扩增片段和Xbarc253的扩增产物中分子量大小为186 bp的扩增片段同时出现，则该待测小麦品种或品系为具有增加小穗数的主效基因位点QTss.cas‑7A的品种或品系，否则，该待测小麦品种或品系属于不具有该位点的品种或品系。