一种用于间接ELISA检测猪PRRSV病毒IgG或IgA抗体的试剂盒

摘要

本发明属于生物检测试剂领域，涉及一种用于间接ELISA检测猪PRRSV病毒IgG或IgA抗体的试剂盒。一种用于间接ELISA检测猪血清或唾液PRRSV病毒IgG或IgA抗体的试剂盒，该试剂盒包含：a)抗体检测板，b)HRP标记的羊抗猪IgG抗体溶液或HRP标记的羊抗猪IgA，c)阳性对照：PRRSV标准阳性血清或唾液，d)阴性对照：PRRSV阴性血清或唾液，e)样品稀释液，f)10×浓缩洗涤液，g)底物显色液，h)终止液。本发明试剂盒用于猪血清或唾液中PRRSV IgG或IgA抗体的有很好的PRRSV特异性和敏感性。重复性试验也表明该试剂盒具有良好的重复性好。

主权项

一种用于间接ELISA检测猪血清或唾液PRRSV病毒IgG或IgA抗体的试剂盒，其特征在于该试剂盒包含：a)抗体检测板，b)HRP标记的羊抗猪IgG抗体溶液或HRP标记的羊抗猪IgA抗体溶液，c)阳性对照：PRRSV标准阳性血清或唾液，d)阴性对照：PRRSV阴性血清或唾液，e)样品稀释液，f)10×浓缩洗涤液，g)底物显色液，h)终止液，其中：所述的抗体检测板为包被PRRSV JXA1重组N蛋白的96孔酶标板；所述的PRRSV JXA1重组N蛋白通过以下方法制备得到：1)根据PRRSV JXA1株设计1对扩增包括N蛋白全基因序列的特异性引物F1：SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2，以PRRSV JXA1株基因组RNA为模板，RT‑PCR扩增PRRSV JXA1株N蛋白基因片段；2)将扩增的片段插入pET‑28a表达载体的EcoRI和XhoI酶切位点间得到重组表达质粒pET‑28a‑N，经双酶切及测序验证；3)将重组表达质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞，培养基因工程菌诱导表达目的蛋白；4)重组菌体离心后，纯化得所述的PRRSV JXA1重组N蛋白。