L-酪氨酸酶法转化制备方法

摘要

本发明提供了一种L-酪氨酸酶法转化制备方法。所述方法的步骤为：1、将有丝氨酸脱氨酶活性和酪氨酸酚裂解酶活性的菌株分别在培养基中培养备用；2、将所述两种细胞与含L-丝氨酸的氨基酸料液混合，加入500g/L的苯酚水溶液，以及浓度为0.2g/L磷酸吡哆醛和浓度为0.01-1.0g/L的表面活性剂，在25～55℃，用体积百分比为25%的氨水调节pH值为6～11的条件下酶促反应6-35小时；3、将转化液在4000转/分钟离心15分钟，收集混合物，用200-7000ml纯水溶解混合物，滴加10mol/L的氢氧化钠调节pH值至12-13，搅拌升温至80℃，滤液用6mol/L的盐酸调节pH值至6，烘干后获得所需的L-酪氨酸。

主权项

一种L‑酪氨酸酶法转化制备方法，其特征在于：所述方法按以下步骤进行： (1)取Escherichia coli K‑12湿菌体10g和Citrobacter freundii ATCC8090湿菌体15g加入到1000ml含90g/L的L‑丝氨酸的混合氨基酸料液中，该混合氨基酸来源于角蛋白水解液，料液中总氨基酸重量比含量10％，再添加0.2g磷酸吡哆醛和0.01g吐温80，流加154ml浓度为500g/L苯酚水溶液，维持转化液中苯酚含量10g/L，用体积百分比浓度为25％的氨水控制转化液pH9，45℃酶促反应15h，反应结束后转化液中L‑酪氨酸浓度为147.3g/L，对L‑丝氨酸摩尔转化率为95％； (2)将转化液4000r/min离心15min，收集湿细胞和固体L‑酪氨酸混合物226g，用2000ml纯水溶解固体混合物，滴加10mol/L氢氧化钠溶液调pH13，搅拌升温至80℃，将固体混合物完全溶解，加活性炭脱色除去菌体细胞，滤液用6mol/L盐酸调pH6，冷却结晶，真空抽滤，用少量纯水洗涤产品，烘干得L‑酪氨酸138g，收率94％，比旋光c＝5，1mol/L盐酸。