发明名称 |
一种酶活提高的胰蛋白酶突变体及其构建方法 |
摘要 |
本发明公开了一种酶活提高的胰蛋白酶突变体及其构建方法,属于基因工程技术领域。本发明的突变体是在序列SEQ ID NO.2所示的氨基酸的基础上,将第1位的酪氨酸突变成了苯丙氨酸,同时将第123位的精氨酸突变成了异亮氨酸。本发明得到的突变体在毕赤酵母中表达,3L罐发酵酰胺酶(BAPNA)酶活为85.3U/mL,酯酶(BAEE)酶活为5954U/mL,相比突变前的菌株,酶活分别提高了3.3倍、2.7倍,解决了胰蛋白酶胞外酶活低的问题。应用该发明中的突变体生产胰蛋白酶,产量高、工艺简化、便于工业化应用。 |
申请公布号 |
CN104328102A |
申请公布日期 |
2015.02.04 |
申请号 |
CN201410612164.X |
申请日期 |
2014.11.04 |
申请人 |
江南大学 |
发明人 |
康振;陈坚;张云丰;堵国成 |
分类号 |
C12N9/76(2006.01)I;C12N15/57(2006.01)I;C12N15/81(2006.01)I;C12N1/19(2006.01)I;C12R1/84(2006.01)N |
主分类号 |
C12N9/76(2006.01)I |
代理机构 |
北京爱普纳杰专利代理事务所(特殊普通合伙) 11419 |
代理人 |
张勇 |
主权项 |
一种酶活提高的胰蛋白酶突变体,其特征在于,所述突变体的氨基酸序列是SEQ ID NO.1所示的序列。 |
地址 |
214122 江苏省无锡市蠡湖大道1800号 |