检测猪血液中猪流行性腹泻病毒特异性IgG抗体的方法

摘要

本发明公开了一种检测猪血液中猪流行性腹泻病毒特异性抗体IgG的方法。方法步骤为：1）猪流行性腹泻病毒抗原的制备和96孔聚苯乙烯反应板包被；2）采集待测猪只的血液，处理后获得血清一抗；3）将血清一抗稀释后，按编号加入抗原包被的反应板上，37℃饱和湿度反应1小时，洗涤；4）将辣根过氧化物酶标记的羊抗猪IgG-FC抗体稀释后，按顺序加入到反应板上，37℃饱和湿度避光反应2小时，洗涤；5）将TMB显色剂，按顺序加入到反应板上，避光反应25分钟，加入终止液；6）放入酶标仪中，读取OD650数据，判定结果。本发明适用于猪群大面积的猪流行性腹泻IgG抗体调查。

主权项

一种检测猪血液中猪流行性腹泻病毒特异性IgG抗体的方法，其特征在于包括如下步骤：1）猪流行性腹泻病毒抗原的制备和抗原包被96孔聚苯乙烯反应板；2）将待测动物保定，从其前腔静脉处取血，将采集到的血液处理后获得血清一抗，保存备用；3）将血清一抗，以质量百分比浓度3%的脱脂奶粉的PBST溶液1:50稀释后，按编号加入抗原包被的96孔聚苯乙烯反应板的反应孔中，每个反应孔加100ul，37℃饱和湿度反应1小时，以PBST洗涤备用；4）将辣根过氧化物酶标记的羊抗猪IgG‑FC抗体，以质量百分比浓度3%的脱脂奶粉的PBST溶液1:10000稀释后，按顺序加入到96孔聚苯乙烯反应板的反应孔中，每个反应孔加100ul，37℃饱和湿度避光反应2小时，以PBST洗涤备用；5）将TMB显色剂按顺序加入到96孔聚苯乙烯反应板的反应孔中，每个反应孔加100ul，避光反应25分钟，随后每个反应孔加入100ul 1M浓硫酸，终止反应；6）放入酶标仪中，读取OD650数据，判定结果。