发明名称 降低芸豆凝集素血凝活性且提高其促α-淀粉酶抑制活性的方法
摘要 本发明涉及降低芸豆凝集素血凝活性且提高其促α-淀粉酶抑制活性的方法,包括步骤:芸豆粗提物的制备;硫酸铵沉淀;60MPa~150MPa下微射流均质处理一次或两次;200MPa-500MPa超高压处理10min~15min;将处理后的芸豆粗提物取出,经冷冻干燥得到芸豆粗提物粉末。经本发明处理以后,芸豆粗提物中的凝集素血凝活性降低同时促α-淀粉酶抑制活性提高,即一方面有效的降低了芸豆的抗营养性,另一方面提高了其有益的促α-淀粉酶抑制活性。
申请公布号 CN102603880B 申请公布日期 2015.01.28
申请号 CN201210087009.1 申请日期 2012.03.29
申请人 华南理工大学 发明人 任娇艳;刘岑岑;赵谋明;崔春;游丽君
分类号 C07K14/42(2006.01)I;C07K1/30(2006.01)I;C07K1/14(2006.01)I 主分类号 C07K14/42(2006.01)I
代理机构 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 代理人 何淑珍
主权项 降低芸豆凝集素血凝活性且提高其促α‑淀粉酶抑制活性的方法,其特征在于包括下列步骤:芸豆提取物的制备:将芸豆与生理盐水混合匀浆,料液比为1:15,4℃静置24h,8000g离心20min,取上清液,得芸豆提取物;硫酸铵沉淀:向上清液中加入固体(NH<sub>4</sub>)<sub>2</sub>SO<sub>4</sub>,使上清液中(NH<sub>4</sub>)<sub>2</sub>SO<sub>4</sub>的质量浓度达到70%,4℃静置过夜,5000g离心30min,取沉淀;将沉淀溶于蒸馏水,透析5h除盐,冷冻干燥得芸豆凝集素粗品;动态微射流均质处理:将芸豆凝集素粗品用磷酸盐缓冲液配制成蛋白浓度1.0%的溶液,在设定压力60 MPa条件下微射流均质一次;静态超高压处理:将芸豆凝集素粗品用磷酸盐缓冲液配制成蛋白浓度3.0%的溶液,用包装袋密封后置于聚四氟乙烯传压套筒内,控制处理过程中样品处理中温度30℃,压力控制在300MPa,保压时间10min;得具有降低芸豆凝集素血凝活性且提高其促α‑淀粉酶抑制活性的芸豆凝集素。2. 降低芸豆凝集素血凝活性且提高其促α‑淀粉酶抑制活性的方法,其特征在于包括下列步骤:芸豆提取物的制备:芸豆粉碎后与生理盐水混合搅拌8小时,料液比为1:15,4℃静置16 h,四层纱布过滤后8000g离心20min,取上清液,得芸豆提取物;硫酸铵沉淀:向上清液中加入固体(NH<sub>4</sub>)<sub>2</sub>SO<sub>4</sub>至65%饱和,0 ~4℃静置过夜,5000g离心30min取沉淀;将沉淀溶于蒸馏水,透析3h,除盐,冷冻干燥得芸豆凝集素粗品;动态微射流均质处理:将芸豆凝集素粗品用磷酸盐缓冲液配制成蛋白浓度1.0%的溶液,在设定压力100 MPa条件下微射流均质二次;静态超高压处理:将芸豆凝集素粗品用磷酸盐缓冲液配制成蛋白浓度3.0%的溶液,用包装袋密封后置于聚四氟乙烯传压套筒内,控制处理过程中样品处理中温度35℃,压力控制在400MPa,保压时间15min;得具有降低芸豆凝集素血凝活性且提高其促α‑淀粉酶抑制活性的芸豆凝集素。3.降低芸豆凝集素血凝活性且提高其促α‑淀粉酶抑制活性的方法,其特征在于包括下列步骤:芸豆提取物的制备:将芸豆与生理盐水混合匀浆,料液比为1:15,4℃静置24 h,四层纱布过滤后8000g离心20min,取上清液,得芸豆提取物;硫酸铵沉淀:向上清液中加入固体(NH<sub>4</sub>)<sub>2</sub>SO<sub>4</sub>至70%饱和,0 ~4℃静置过夜,8000g离心30min取沉淀;将沉淀溶于蒸馏水,透析4h,除盐,冷冻干燥得芸豆凝集素粗品;动态微射流均质处理:将芸豆凝集素粗品用磷酸盐缓冲液配制成蛋白浓度1.5%的溶液,在设定压力150 MPa条件下微射流均质一次;静态超高压处理:将芸豆凝集素粗品用磷酸盐缓冲液配制成蛋白浓度3.0%的溶液,用包装袋密封后置于聚四氟乙烯传压套筒内,控制处理过程中样品处理中温度15℃,压力控制在450MPa,保压时间10min;得具有降低芸豆凝集素血凝活性且提高其促α‑淀粉酶抑制活性的芸豆凝集素。4.降低芸豆凝集素血凝活性且提高其促α‑淀粉酶抑制活性的方法,其特征在于包括下列步骤:芸豆提取物的制备:芸豆粉碎后与生理盐水混合搅拌8h,料液比为1:15,4℃静置16 h,四层纱布过滤后8000g离心20min,取上清液,得芸豆提取物;硫酸铵沉淀:向上清液中加入固体(NH<sub>4</sub>)<sub>2</sub>SO<sub>4</sub>至70%饱和,0 ~4℃静置过夜,8000g离心30min取沉淀;将沉淀溶于蒸馏水,透析3.5h,除盐,冷冻干燥得芸豆凝集素粗品;动态微射流均质处理:将芸豆凝集素粗品用磷酸盐缓冲液配制成蛋白浓度1.5%的溶液,在设定压力150 MPa条件下微射流均质一次;静态超高压处理:将芸豆凝集素粗品用磷酸盐缓冲液配制成蛋白浓度2.5%的溶液,用包装袋密封后置于聚四氟乙烯传压套筒内,控制处理过程中样品处理中温度为20℃,压力控制在500MPa,保压时间10min,得具有降低芸豆凝集素血凝活性且提高其促α‑淀粉酶抑制活性的芸豆凝集素。
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