一种用于磁共振示踪肿瘤细胞的诊断剂

摘要

本发明公开了一种用于磁共振示踪肿瘤细胞的诊断剂，包含人端粒酶逆转录酶启动子、铁蛋白报告基因和慢病毒载体、包装质粒和包装细胞。端粒酶逆转录酶启动子调控铁蛋白报告基因在肿瘤细胞内特异性过表达，供磁共振检测恶性肿瘤。

主权项

一种用于磁共振示踪肿瘤细胞的诊断剂，其特征在于,包含人端粒酶逆转录酶(hTERT)启动子、铁蛋白报告基因、慢病毒载体、包装质粒和包装细胞,所述铁蛋白报告基因为带有flag标签蛋白序列的铁蛋白重链全基因,所述包装质粒为pCD/NL‑BH*DDD和pLTR‑G，所述包装细胞为293T,人端粒酶逆转录酶启动子调控铁蛋白报告基因在慢病毒载体内表达,所述磁共振示踪肿瘤细胞的诊断剂由以下方法制得，所述包括以下步骤：1)根据Genbank代号为NM_010239的铁蛋白重链基因序列信息人工合成目的基因并接入flag标签蛋白序列，在其两端引入限制性内切酶NheI和BamHI识别位点，利用DNA连接酶将所述蛋白序列克隆入慢病毒载体；2)用Spe I和Xba I对步骤1)的慢病毒载体进行双酶切，酶切产物电泳后回收无CMV的载体片段；3)从含hTERT的质粒中PCR扩增hTERT启动子片段重组入步骤2)的无CMV的载体片段构建成目的慢病毒载体；4)对步骤3)的慢病毒包装，采用pCD/NL‑BH*DDD和pLTR‑G包装质粒，293T包装细胞，得到Lenti‑hTERT‑Fth‑flag‑Puro慢病毒表达载体，即得诊断剂。