发明名称 一种检测转bar基因甘蔗的方法和应用
摘要 本发明公开了一种检测转bar基因甘蔗的方法和应用。本发明通过将待检测的甘蔗叶片直接浸泡在除草剂溶液中进行处理,同时以不含有bar基因的甘蔗叶片作为对照,通过直接观察伤害程度就能判断结果。该方法应用于含有bar基因的甘蔗植株的鉴定,特别适合转基因再生植株的快速检测,能够大大降低转基因植株分子检测工作,大幅度提高检测效率,降低检测成本。
申请公布号 CN101698883B 申请公布日期 2015.01.28
申请号 CN200910193440.2 申请日期 2009.10.29
申请人 广东省农业科学院作物研究所 发明人 王继华;曹干;张剑亮
分类号 C12Q1/68(2006.01)I 主分类号 C12Q1/68(2006.01)I
代理机构 广州市华学知识产权代理有限公司 44245 代理人 裘晖
主权项 一种检测转<i>bar</i>基因甘蔗的方法,其特征在于包括以下步骤:(1)选取生长部位一致的野生型甘蔗叶片,剪成长度为2~5cm的小段,分别浸没于5ml的不同浓度梯度的膦丝菌素溶液中,然后置于人工气候箱中进行培养3~5天观察结果,确定能够伤害野生型甘蔗叶片的膦丝菌素溶液的最低浓度,导致野生型甘蔗叶片刚刚全部变黄的膦丝菌素溶液的浓度为最低浓度;(2)取待检测的甘蔗叶片,剪成长度为2~5cm的小段,同时取与待测甘蔗叶片老嫩程度相同的野生型甘蔗叶片作为对照,同样剪成2~5cm小段,分别置于5ml能够伤害野生型甘蔗叶片的膦丝菌素溶液的最低浓度中,在人工气候箱中以与步骤(1)相同的培养条件培养3~5天;然后通过和作为对照的野生型甘蔗叶片比较,叶片保持绿色的即为抗除草剂转基因甘蔗。
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