APP、M.hyo、PCV-2及PRRSV多重PCR检测用引物、试剂盒和检测方法

摘要

本发明公开了一种APP、M.hyo、PCV-2及PRRSV多重PCR检测用引物、试剂盒及检测方法。本方法根据GenBank中上述4种病原体的基因保守序列，设计了4对PCR特异性引物，利用优化的多重PCR体系同时检测APP、M.hyo、PCV-2及PRRSV4种猪病病原中的一种或多种，对其他常见病原的基因组无特异性扩增，检测病原基因组最低浓度可达到pg级。该试剂盒包括扩增反应液管、阳性对照管、阴性对照管和灭菌去离子水。该发明能在3h内完成对待检样品中的APP、M.hyo、PCV-2及PRRSV四种病原的单一或混合感染的检测，且操作简便、快捷、结果准确，灵敏度高。

主权项

APP、M.hyo、PCV‑2及PRRSV多重PCR检测用引物，其特征在于：包括猪传染性胸膜肺炎放线杆菌的PCR特异性上游引物，其DNA序列为APP SEQ NO.1；猪传染性胸膜肺炎放线杆菌的PCR特异性下游引物，其DNA序列为APP SEQ NO.2；猪肺炎支原体的PCR特异性上游引物，其DNA序列为M.hyo SEQ NO.3；猪肺炎支原体的PCR特异性下游引物，其DNA序列为M.hyo SEQ NO.4；猪圆环病毒2 型的PCR特异性上游引物，其DNA序列为PCV‑2 SEQ NO.5；猪圆环病毒2 型的PCR特异性下游引物，其DNA序列为PCV‑2 SEQ NO.6；猪繁殖与呼吸综合征病毒的PCR特异性上游引物，其DNA序列为PRRSV SEQ NO.7；猪繁殖与呼吸综合征病毒的PCR特异性下游引物，其DNA序列为PRRSV SEQ NO.8。