一种高细胞凋亡诱导活性枸杞多糖的提取方法

摘要

本发明涉及一种高细胞凋亡诱导活性枸杞多糖的提取方法，以枸杞子为原料，经提取得到枸杞粗多糖后，采用截留分子量为30K的超滤膜对枸杞多糖进行分离，收集滤出液，再以截留分子量为10K的超滤膜对上述滤出液分离，收集截留液1，滤出液再用截留分子量为4K的超滤膜分离，收集滤出液1，将截留液1和滤出液1经真空浓缩、冷冻干燥，得高细胞凋亡诱导活性枸杞多糖。本发明提取方法以水提法提取枸杞多糖，脱蛋白，然后采用超滤技术对多糖进行分级分离，采用多个截留分子量的超滤膜进行多次分离，克服了柱层析操作复杂，不利于工业或生产等缺点，具有效率高、成本低、操作简单、条件温和、生产周期短等优点，为活性化合物的开发及工业化应用提供了新思路。

主权项

一种高细胞凋亡诱导活性枸杞多糖的提取方法，其特征在于：提取过程中采用超滤法对枸杞多糖进行分级分离；所述的采用超滤法对枸杞多糖进行分级分离步骤为：采用截留分子量为30K的超滤膜对枸杞多糖溶液进行分离，收集滤出液，再以截留分子量为10K的超滤膜对上述滤出液分离，收集截留液；滤出液再用截留分子量为4K的超滤膜分离，收集滤出液；具体步骤如下：⑴枸杞多糖的提取：称取干燥的枸杞子，按枸杞子：乙醇溶液＝1：3～6(g：ml)的比例加入质量分数为70％的乙醇，打浆、回流、过滤得滤渣，向滤渣中再按1：2～4(g：ml)加入70％的乙醇，回流、过滤，滤渣再重复上述操作2～4次；收集滤渣，挥去乙醇，按1：3～5(g：ml)加入蒸馏水，沸水浴浸提、过滤、收集滤液，将滤渣重复上述提取，合并滤液，真空浓缩；加无水乙醇至终质量浓度为80％，分离、收集沉淀，挥发去除乙醇，复溶、脱蛋白、真空浓缩，得到枸杞粗多糖；⑵超滤一：将枸杞粗多糖配制成浓度为1.0mg/mL枸杞多糖溶液，选用截留分子量为30K的中空纤维超滤膜，在压力为0.08MPa，室温下超滤至多糖溶液体积变为原来的1/2时，以蒸馏水将其体积补足至原体积，继续超滤，重复上次操作7～11次，收集滤出液备用；⑶超滤二：取步骤⑵中滤出液，调整其浓度为1.0mg/mL，选用截留分子量为10K的中空纤维超滤膜，在压力为0.003MPa，室温下超滤至多糖溶液体积变为原来的1/2时，以蒸馏水将其体积补足至原体积，继续超滤，重复上次操作4～6次，收集截留液，得截留液1；滤出液备用；⑷超滤三：取步骤⑶中滤出液，调整其浓度为1.0mg/mL，选用截留分子量为4K的中空纤维超滤膜，在压力为0.08MPa，室温下超滤至多糖溶液体积变为原来的1/2时，以蒸馏水将其体积补足至原体积，继续超滤，重复上次操作4～6次，收集滤出液，得滤出液1；⑸将截留液1和滤出液1分别经真空浓缩，冷冻干燥，即为高细胞凋亡诱导活性枸杞多糖。