发明名称 |
一种卡贝缩宫素的纯化方法 |
摘要 |
本发明涉及一种卡贝缩宫素的纯化方法,其特征包括以下步骤:步骤1.将卡贝缩宫素粗品用水溶解,调节pH到酸性;步骤2.按体积分数设置梯度,使用流动相A冲洗聚合物反相填料柱;步骤3.将步骤1溶液载入聚合物反相填料中;步骤4.按体积分数设置梯度,洗脱梯度的初始状态流动相B为5%,保持2分钟,然后在5分钟内将流动相B比例增至25%,然后在30分钟内将流动相B比例增至40%。收集全部洗脱馏分;步骤5.将洗脱馏分经过干燥得到纯品卡贝缩宫素。 |
申请公布号 |
CN103435687B |
申请公布日期 |
2015.01.28 |
申请号 |
CN201310399939.5 |
申请日期 |
2013.09.05 |
申请人 |
杭州阿德莱诺泰制药技术有限公司 |
发明人 |
路杨;杨东晖;周亮;张阳萍 |
分类号 |
C07K7/16(2006.01)I;C07K1/20(2006.01)I |
主分类号 |
C07K7/16(2006.01)I |
代理机构 |
北京华科联合专利事务所(普通合伙) 11130 |
代理人 |
孟旭;王为 |
主权项 |
一种纯化卡贝缩宫素的方法,该方法采用聚合物反相色谱法,可使成品卡贝缩宫素中的杂质D‑Cys5‑卡贝缩宫素含量降低到0.1%以下,其特征在于,所述方法包括以下步骤:步骤1,样品处理:将1.70g卡贝缩宫素粗肽溶解于1000ml 纯净水中,使用醋酸调节pH为3.4;步骤2,平衡按体积分数设置梯度,使用100%的流动相A冲洗聚合物反相填料柱10min;步骤3,上样将步骤1得到的样品溶液载入步骤2冲洗过的聚合物反相填料柱中;步骤4,洗脱按体积分数设置梯度,梯度的初始状态流动相B为5%,保持2分钟,然后在5分钟内将流动相B比例增至25%,然后在30分钟内将流动相B比例增至40%,分部收集洗脱馏分;步骤5,冻干将步骤4得到的洗脱馏分经过冻干得到纯品卡贝缩宫素;其中,聚合物反相填料柱为UniPS<sup>TM</sup>10,10μm,50mm ×250 mm;流动相:A为0.3%醋酸水溶液; 流动相B为乙腈;梯度程序为:初始状态流动相B为5%,保持2分钟,然后在5分钟内将流动相B比例增至25%,然后在30分钟内将流动相B比例增至40%,流速为:80 mL/min,检测波长为220 nm。 |
地址 |
310018 浙江省杭州市经济技术开发区6号大街452号杭州市高科技孵化器1号孵化大楼3B01-3B04号房 |