针对全血的卵巢癌细胞检测试剂盒

摘要

本发明提供了针对全血的卵巢癌细胞检测试剂盒。所述试剂盒主要包含能够特异性识别卵巢癌细胞人附睾蛋白（HE4）抗原的HE4山羊多克隆抗体及生物素化的牛血清蛋白（BSA）-叶酸（FA），链霉亲和素化的纳米磁珠（SA-IO）、链霉亲和素化的QDs（SA-QDs）、生物素化抗HE4兔抗羊IgG以及连接试剂等。所述试剂盒可利用免疫磁珠的可富集特性高效分离卵巢癌患者全血中的癌细胞，并通过SA-QDs与生物素化的HE4抗原抗体复合物特异性结合靶向卵巢癌细胞，实现多重信号协同放大。该试剂具有较强的灵敏性和特异性，在卵巢癌的早期检测中具有极广阔的应用前景。

主权项

针对全血的卵巢癌细胞检测试剂盒，其特征在于：所述试剂盒包括1）HE4山羊多克隆抗体；2）生物素化的BSA‑FA；3）链霉亲和素化的纳米磁珠SA‑IO；4）链霉亲和素化的QDs即SA‑QDs；5）生物素化抗HE4兔抗羊IgG； 所述的SA‑QDs，其制备方法如下：1）100 μL 8 μmol/L QDs溶于100 μL pH为5.5的BB，按照QD:EDC摩尔比1:1 000，QD:NHS摩尔比1:2 000加入EDC/NHS，室温反应5~10 min；2）调整溶液pH到8~8.5，加入SA 1.056 mg，持续混匀2 h后，加入10 μL含5% BSA的PBS封闭10 min终止反应；3）SA‑QDs复合物10 000 r/min，离心5 min除去沉淀后，使用2 mL pH为7的BB在100K超滤管中洗涤，最后重悬于0.1 mL pH为7的BB中。