一种适于流式细胞分析的茄子叶片细胞核提取方法

摘要

本发明提供了一种适于流式细胞仪分析的茄子叶片细胞核提取方法，属于生物技术领域。包括细胞核提取缓冲液制备，取样，制备细胞核悬浮液和流式细胞仪分析。细胞核提取缓冲液组分为：CPW盐溶液，0.5Mmannitol，3mmol/L的HEPES，0.25%PEG，0.5%TritonX-100，0.25%巯基乙醇，pH6.5-7.0。本发明还通过确定合适的样品数量以及多次过滤解决了茄子叶片细胞核提取得率和纯度低的问题。提取时间短，获得的茄子叶片细胞核纯度高，有利于进行流式细胞仪分析，获得的流式图谱中的峰值高，受杂质峰的影响小，容易鉴定出待测材料的DNA倍性，为茄子材料大批量的倍性鉴定奠定了基础。

主权项

一种适于流式细胞分析的茄子叶片细胞核提取方法，其特征在于，其所用的细胞核提取缓冲液组分为：CPW盐溶液：KH₂PO₄ 27.2mg/L, KNO₃ 101.0mg/L, CaCl₂.2H₂O 1480.0mg/L, MgSO₄.7H₂O 246.0mg/L, KI 0.16mg/L, CuSO₄.5H₂O 0.025mg/L, pH 5.8；0.5M 甘露醇mannitol，3mmol/L的4‑羟乙基哌嗪乙磺酸HEPES，0.25%（w:v）PEG，0.5%（v:v）Triton X‑100，0.25%（v:v）巯基乙醇，pH6.5‑7.0。