一种荧光检测二价铜离子的方法

摘要

本发明提供了一种二价铜离子的荧光检测方法，具体地说是基于一种商业可得的1，8-二氨基萘（DAN）检测二价铜的方法。检测方法是以DAN为荧光探针，在pH为7.0的HEPES溶液中定量地检测二价铜离子的含量。该检测方法，对二价铜离子显示了高的灵敏性和选择性，检测过程简便、灵敏、快速，检测结果准确。

主权项

一种检测二价铜离子的方法：其特征在于，步骤为：(1)、配制pH＝7.0、浓度为10mM的HEPES缓冲溶液，并用乙醇配制2mM的1,8‑二氨基萘乙醇溶液；(2)、按体积比2000:1将HEPES缓冲溶液和1,8‑二氨基萘乙醇溶液加到干净的荧光比色皿中，在荧光分光光度仪上检测，随着待测样的加入,435nm的荧光强度逐渐减弱；(3)、用蒸馏水配制2mM的Cu²⁺溶液，把2mL的HEPES缓冲溶液和1μL的1,8‑二氨基萘乙醇溶液加到荧光比色皿中，逐渐加入Cu²⁺溶液的体积为0.5、1、1.5、2、2.5、3、3.5、4、4.5、5uL，同时在荧光光谱仪上测定435nm的对应的荧光强度F为529、490、469、422、400、373、335、305、236，以Cu²⁺浓度为横坐标，以相对荧光强度F₀‑F为纵坐标绘制图，F₀﹦570，得到Cu²⁺浓度的工作曲线；线性回归方程为：F₀‑F＝10.9+64.0c，c的单位为10^‑6mol/L；(4)、将HEPES缓冲溶液2000uL和1,8‑二氨基萘乙醇溶液1uL加到干净的荧光比色皿中，用微量进样器吸取V ul待测样品溶液，加入到此干净的荧光比色皿中，在荧光分光光度仪上检测，将测得的荧光强度代入步骤(3)的线性回归方程，得到浓度c，待测样品C_待测样＝2000uL×c×10^‑6/VuL,即可求得Cu²⁺的浓度。