具有免疫增强活性和抗病毒功效的植物多糖硫酸酯化物的制备方法及应用

摘要

本发明公开了一种具有免疫增强活性和抗病毒功效的植物多糖硫酸酯化物及其制备方法。其制备方法为从中药川明参中提取和精制多糖，然后将川明参多糖均匀分布于无水甲酰胺中，加入酯化试剂，在一定的温度下制成川明参多糖硫酸酯化物。所制备的川明参多糖硫酸酯化物具有免疫增强活性以及体外抗新城疫病毒、鸭瘟病毒活性，可作为一种抗病、促生长和无残留的生物饲料添加剂在畜禽中使用。

主权项

一种具有免疫增强活性和抗病毒功效的植物多糖硫酸酯化物的制备方法，其特征在于：提取和精制中药川明参中多糖，然后在川明参多糖中添加酯化试剂制备成川明参多糖硫酸酯化物；川明参多糖的制备：称取300g的川明参干燥粉末置于索式提取器中，用1∶1(V/V)的乙醇、乙醚混合液加热回流脱脂6h，过滤后药渣置于室温下干燥；将蒸馏水按料液比1∶20(g/ml)加入药渣中，100℃提取3次，每次3h，合并提取液，浓缩至小体积，用流水透析48h后蒸馏水透析24h，透析袋内液体积为提取液1/5的三氯甲烷，随后再加入体积为三氯甲烷1/5的正丁醇，剧烈振摇20min，离心除去水层与有机层交界处的变性蛋白质，水层仍按照此方法反复除蛋白5次；浓缩后加入3倍量95％乙醇(V/V)静置过夜；离心收集沉淀，依次用无水乙醇、丙酮洗涤后，离心分离，沉淀物置于40℃真空干燥得川明参多糖；制备酯化试剂：氯磺酸与吡啶1∶6的体积比(V/V)，在冰盐浴以及不断搅拌下，将氯磺酸逐滴加入到预冷的50mL无水吡啶中；将300mg川明参多糖边搅拌边加入到20mL无水甲酰胺中，继续搅拌30min使多糖在无水甲酰胺中分布均匀；然后加入酯化试剂，在60℃水浴温度下搅拌反应2h；反应完毕后，冷却至室温，再加入质量百分浓度为15％NaOH溶液调pH值至7.0‑8.0，流水透析72h后蒸馏水透析24h；乙醇沉淀，丙酮、无水乙醚分别洗涤，真空干燥24h后得到川明参多糖硫酸酯化物。